[发明专利]HPLC‑DAD同时检测面食中多种合成色素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及合成色素检测技术领域，尤其涉及一种HPLC-DAD同时检测面食中多种合成色素的方法。

背景技术

合成色素多以煤焦油或苯、萘等芳香烃化合物为原料，经过一系列有机反应合成，本身并无无营养价值。人工合成色素具有色彩鲜艳、成本低廉、着色力强、性质较稳定等天然色素所不及的优点，因而被广泛应用于食品加工过程。但合成色素多含有害物质，过量摄入会对人体健康造成损失，其安全性问题日益受到重视，各国对此均有严格的限制。因此准确定量食品中所含合成色素对食品安全具有重要意义，也可以为食品监管部门提供技术支持和处罚依据。

目前，检测合成色素的国标方法有液相色谱法、液相色谱-质谱/质谱法、微柱色谱法等，但大多数方法仅能同时检测少数几种色素，且前处理过程繁琐、回收率低，尤其是我国尚未有同时检测多种色素的国标，类似方法偶有报道也多以饮料、糖果等简单基质进行分析，对于复杂基质多组分同时检测值得探讨。况且基层食品检测实验室人员少，样品种类多，检测项目复杂，工作量大，因此一种能同时检测多种合成色素的方法是提高检测效率降低检测成本的必要选择。

综上可知，现有技术在实际使用上显然存在不便与缺陷，所以有必要加以改进。

发明内容

针对上述的缺陷，本发明的目的在于提供一种HPLC-DAD同时检测面食中多种合成色素的方法，通过HPLC-DAD检测方法，简化了前处理步骤，不需要再进行固相萃取和浓缩步骤，大大缩短了前处理时间。采用绝大部分干扰物无响应的400-600nm波长进行检测，避免大部分食品添加剂和天然色素的干扰。

为了实现上述目的，本发明提供一种HPLC-DAD同时检测面食中多种合成色素的方法，包括如下步骤：

A、配制标准工作溶液及样品制备

标准工作溶液的制备：精密称量各标准色素并分别用水定容至所需浓度；

样品制备：选用不含合成色素的空白样，等量加入各所述标准色素制成样品；

B、样液提取

称取粉碎后的样品放入离心管，加提取液涡旋均匀后超声；然后加入蛋白质沉淀剂，混匀后在离心机上离心处理；然后提取上清液并经滤膜过滤；

C、取步骤B所得溶液进行HPLC-DAD分析，分析条件如下：

C18色谱柱：5μm，250×4.6mm；

流动相：甲醇和乙酸铵溶液；

梯度洗脱；

流速：1.0mL/min；

柱温：30℃；

进样量：10μL；

检测波长：400-600nm；

D、用标准曲线计算被测物质的含量。

所述步骤B样液提取具体为：称取2.0g粉碎后的样品于15mL离心管，加入8mL乙醇-氨溶液涡旋均匀后超声提取10min；加亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液，混匀后在离心机上以5000r/min离心5min，然后取上清液经0.22μm滤膜过滤。

制备所述标准工作溶液、乙酸铵溶液、亚铁氰化钾溶液以及乙酸锌溶液所用的水为纯净水。

所述亚铁氰化钾溶液浓度为106g/L，所述乙酸锌溶液的浓度为220g/L，所述乙醇-氨溶液为:1mL氨水，与100mL浓度为70％乙醇混合而成。

所述亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液的加入量均为1ml。

所述乙酸铵溶液的浓度为10mmol/L，所述梯度洗脱条件如下表所示：

所述标准工作溶液的浓度分别为：1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL及20.0μg/mL。

所述多种合成色素的检出限：0.4-0.6mg/kg；相关系数大于0.998；线性范围1-20mg/L；回收率：88.4％-96.1％；RSD：0.83％-5.24％。

所述合成色素为十种，分别为：柠檬黄、新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、酸性红、赤藓红、酸性橙Ⅱ。

本发明的目的在于提供一种HPLC-DAD同时检测面食中多种合成色素的方法，通过HPLC-DAD检测方法，简化了前处理步骤，不需要再进行固相萃取和浓缩步骤，大大缩短了前处理时间。采用绝大部分干扰物无响应的400-600nm波长进行检测，避免大部分食品添加剂和天然色素的干扰。能够一次性有效检出十种人工合成色素。结果表明，本发明的方法准确、快速、简便、定量结果可靠，非常适合同时处理多批次样品。

附图说明

图1是本发明的混合标准溶液色谱图；

图2是本发明的柠檬黄光谱图；