[发明专利]通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法

说明书

技术领域

本发明属于中国鲎养殖技术领域，尤其涉及一种通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法。

背景技术

中国鲎(Tachypleus tridentatus)，又名三刺鲎，隶属节肢动物门(Arthropoda)、有鳌肢亚门(Chelicerta)，肢口纲(Merostomata)、剑尾目(Xiphosura)、鲎科(Limulidae)，主要分布于日本九州以南，瓜哇岛以北，菲律宾以西的亚洲东岸及东南岸海域，在中国长江以南的浙江、福建、广东、广西、海南均有发现，现以广东、广西为多，俗称公母鲎。它早在3亿年钱的泥盆纪就生活在地球上，至今仍保持其形态，有“活化石”之称。现在地球上生存的鲎有四种：美洲鲎，东方鲎，南方鲎和圆尾鲎。Bang F.C.1956年发现鲎的血细胞遇革兰氏阴性细菌产生凝和Nakmura T.1988年发现鲎血细胞提取的阳离子肽——鲎素Tachyplesin)的抗菌病毒机理以来，鲎的经济价值变得越来越大。由于鲎试剂的生产开发，大量的捕杀成体鲎抽取血液，二十多年前已有关于中国鲎数量急剧下降已告急的报道。为了补充这一珍贵的海洋动物，如今已有多地进行中国鲎人工育苗的研究。在人工育苗过程中胚胎发育有较为重要的研究价值，中国鲎的胚胎早期发育可分为卵裂和囊胚形成期、原肠胚和附肢原基形成期、组织分化期、快速生长期。在组织分化期，胚体共进行3次胚内蜕皮，并在第2次蜕皮的同时卵胶膜破裂蜕去，完成3次胚内蜕皮的胚体身体扁平，各组织器官基本成型定位。在快速生长期内，胚体完成最后一次胚内蜕皮，蜕皮后胚体进一步扁平，各组织器官进一步完善。第4次蜕皮后3到5天时间胚体破坏内卵膜而孵化为自由游泳的一龄幼鲎。特别值得注意的是快速生长期的胚胎各组织器官已定型并进一步完善，卵径可达6.0mm左右，约为受精卵的1.8倍，能很清晰地观察到胚胎内的胚体，并且作为胚胎期过度到幼鲎期的一个阶段，对外界环境变化比较敏感，此阶段的胚胎是作为胚胎期的最佳试验材料。在人工育苗及养殖过程中常需要用到药物进行相应疾病的预防及治疗，但药物同时也会对水产动物本身有一定的毒性影响，但迄今为止，药物对鲎的毒性试验的研究报道甚少。水产生产中常用二氧化氯这2种药物进行疾病的预防及治疗。二氧化氯属强氧化剂，它的消毒机理是通过与水体作用用释放出新生态氧，使微生物的蛋白变性而失去活性达到杀灭病原体的目的，是高效广谱的消毒剂，它作用水体后不生成有害物质(卤代有机物)，水生生物又不产生抗药性，无残留，是一种绿色环保消毒剂。

综上所述，现有技术存在的问题是：在人工育苗及养殖过程中用到药物进行相应疾病的预防及治疗，药物同时也会对水产动物本身有毒性影响。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法。

本发明是这样实现的，一种通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法，所述通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法包括：

所述二氧化氯安全质量浓度为13.8mg·L^-1；

所述二氧化氯对中国鲎胚胎的12h、24h、48h、72h和96h半致死质量浓度分别为84.4mg·L^-1、58.9mg·L^-1、54.3mg·L^-1、52.1mg·L^-1、50.6mg·L^-1。

进一步，所述通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法采用急性毒性试验和SPSS 17.0软件的单因素方差分析进行统计分析；用Duncan及LSD法进行组间多重比较，用Probit回归分析，求半致死浓度LC₅₀，计算安全质量浓度。

进一步，所述计算安全质量浓度的公式为：

进一步，所述通过控制二氧化氯浓度提高中国鲎胚胎存活率和孵化率的方法的二氧化氯不同试验时间下的毒力回归方程为：

12h Y＝-4.911+0.058X；

24h Y＝-11.951+0.203X；

48h Y＝-11.950+0.218X；

72h Y＝-11.963+0.229X；

96h Y＝-11.971+0.237X。