[发明专利]用于降解烟叶中蛋白质的SMXP-03菌株及其应用

说明书

本发明属于烟草微生物发酵技术领域，具体涉及一株用于降解烟叶中蛋白质的短小芽孢杆菌SMXP‑03菌株及其在烟叶发酵中的应用。该菌株为短小芽孢杆菌 SMXP‑03，现保藏于武汉中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2017291。本发明通过特定菌株的筛选，设计了较为简便的菌剂处理烟叶的技术方案，使得本发明具有：工艺流程较为简便，烟叶处理成本较低，且处理周期较短，可明显降低烟叶中的蛋白质含量等技术优点，因而在卷烟制造技术领域具有较好地推广应用价值。

技术领域

本发明属于烟草微生物发酵技术领域，具体涉及一株用于降解烟叶中蛋白质的短小芽孢杆菌SMXP-03菌株及其在烟叶发酵方面的应用。

背景技术

烟草是我国的重要经济作物之一，在国民经济中占有重要的地位。而烟叶是烟草行业发展的基础，持续提高烟叶质量水平是烟叶生产的重要目标之一，“提高质量、优化结构”一直以来也都是烟叶工作的重点。

蛋白质是烟叶中的重要化学成分，其含量的高低与烟草品质密切相关。蛋白质含量过高对于烟草制品的抽吸品质是不利的，在燃吸时会产生如同燃烧羽毛的臭味，同时还会产生辛辣、苦涩的感觉。因此，利用合适的方法将烟叶中的蛋白质降解成氨基酸等小分子物质，从而进一步参与美拉德反应产生致香物质及致香前体物，是提高烟叶品质的有效途径之一。

目前，国内烤烟蛋白含量普遍偏高，纯粹依赖烟草自身酶类的水解作用远不能满足卷烟工业对高品质烟叶原料的需求。因此，如何利用外源微生物制剂或者酶制剂，快速高效的降低烟叶中蛋白质含量，从而提高烟叶品质，已成为科技工作者普遍关注的热点课题。

发明内容

本发明目的在于提供了一株能够高效降解烟叶中蛋白质物质的短小芽孢杆菌SMXP-03菌株，从而能够有效促进烟叶中大分子蛋白质的降解，提高烟叶整体品质。

本申请所采取的详细技术方案如下。

一株用于降解烟叶中蛋白质的SMXP-03菌株，该菌株属于短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus），最初是由2013年三门峡产的复烤烟叶中分离而来，其保藏名称为：短小芽孢杆菌SMXP-03，分类学名称为Bacillus pumilus SMXP-03，已于2017年6月12日保藏于武汉中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号为CCTCC NO：M 2017291。

利用所述用于降解烟叶中蛋白质的SMXP-03菌株所制备的菌剂，通过如下步骤制备而成：

（1）活化菌种，将SMXP-03菌株置于NA固体培养基上，37℃条件下培养24 h~72 h；

（2）制备种子液，刮取步骤（1）中所培养的菌体，接种于液体NA培养基中，30℃摇床培养；

（3）扩大培养，将步骤（2）中种子液转接液体NA培养基，培养至OD₆₀₀=1.8~2.0；

（4）制备菌剂，将步骤（3）中发酵液离心，弃上清，然后加入无菌水进行悬浮，调整活菌数为（9~10）×10⁷个/mL。即为用于降解烟叶中蛋白质的菌剂。

制备过程中，培养基组分单位以g/L计，所述NA固体培养基组成为：胰蛋白胨10 ，牛肉膏3，NaCl 5，琼脂粉 12，pH=7.0左右；所述NA液体培养基组成为：胰蛋白胨10，牛肉膏3，NaCl 5，pH=7.0左右。