[发明专利]一组用于区分芝麻13对染色体的BAC标记

说明书

本发明属于芝麻染色体组技术领域，具体涉及一组用于区分芝麻13对染色体的BAC标记专利申请事宜。该组BAC标记共包括17个BAC信息，BAC标记基本信息具体如下表所示，BAC双末端碱基序列信息具体如SEQ ID NO.1~34所示。本申请所提供17个BAC标记在染色体上均为单一特异位点，具有位点的特异性和唯一性；利用本申请所提供的区分方法可以准确识别并确定芝麻各条染色体，可用于芝麻高密度细胞遗传图谱构建、芝麻基因组精细图校对等研究，具有重要科研理论意义和科研价值，可为后续芝麻染色体组学研究、芝麻育种提供理论支持和奠定应用基础。

技术领域

本发明属于芝麻染色体组技术领域，具体涉及一组用于区分芝麻13对染色体的BAC标记专利申请事宜。

背景技术

芝麻（Sesamum indicum L.，2n=26），属胡麻科胡麻属中唯一的栽培种，也是我国重要的特色优质油料作物。芝麻籽粒中油脂含量为50~60%，油酸/亚油酸比例约为1:1，因此被认为是人类最为理想的食用油脂之一。此外，芝麻种子中还含有芝麻酚、芝麻素和维生素E等天然抗氧化类物质，在降血脂、抗菌防癌和延缓人体衰老等医疗保健方面具有重要的功效。

芝麻属于小染色体作物，染色体数目多，且形态相似，在一定程度上限制了芝麻细胞遗传学研究的发展。自上世纪80年代以来至今，我国科研工作人员相继开展了芝麻染色体数目和形态特征观察，染色体带型分析和染色体组型研究。近几年来，为揭示芝麻染色体组及基因组特征，我国芝麻科研工作者对芝麻染色体制片技术进行了系统研究（刘艳阳等，2011，芝麻染色体常规制片技术关键因子的优化研究；张海洋等，2012，芝麻染色体核型及似近系数分析）。

但是，由于芝麻的13对染色体形态较为相似，且染色体制片质量和发育时期等因素均能影响原位杂交结果，因此目前尚缺乏一种较为稳定的、且准确区分13对芝麻染色体并对其准确命名的方法。也因此，如果能开发一套能准确区分芝麻13对染色体的稳定性和特异性均较强的分子标记，对推动芝麻染色体组和基因组学发展就显得十分必要。

2012年以来，为配合芝麻基因组精细图构建以及重要性状功能基因组学研究，河南省农业科学院芝麻研究中心先后构建了芝麻栽培种（豫芝11号）基因组的BAC和BIBAC文库。随后在完成芝麻染色体制片技术优化的基础上，建立了芝麻BAC-FISH技术和染色体片重复BAC-FISH杂交技术（参考申请号2014103220094专利），从而为芝麻染色体的进一步深入研究奠定了一定的技术基础。但总体而言，由于芝麻染色体鉴定、区分时面临着稳定性和准确性的特殊要求，因而在利用BAC-FISH技术进行相关研究时，仍然面临着较多技术难题。

发明内容

本发明的主要目的是提供一组用于区分芝麻13对染色体的特异性BAC标记，利用这组BAC标记和现有BAC-FISH技术，提供一种区分芝麻13对染色体的方法，从而为芝麻基因组的进一步深入研究奠定理论和应用基础。

本发明所采取的技术方案详述如下。

一组用于区分芝麻13对染色体的BAC标记，该BAC组标记共包括17个BAC信息，BAC标记基本信息具体如下表所示：

需要解释的是，探针名称中“G”表示该探针为绿色荧光标记，“R”表示该探针为红色荧光标记；

BAC双末端碱基序列信息具体如SEQ ID NO.1~34所示，即：

利用所述用于区分芝麻13对染色体的BAC标记组的区分芝麻13对染色体的区分方法，具体包括如下操作步骤：

（一）芝麻染色体标本制备

以芝麻根尖作为样品，制备根尖染色体片标本；具体而言，以豫芝11号种子的1.2~1.8cm根尖作为样品，制备芝麻染色体标本；