[发明专利]一种口蹄疫抗原的定量方法有效
申请号: | 201710796728.3 | 申请日: | 2017-09-06 |
公开(公告)号: | CN109387581B | 公开(公告)日: | 2020-01-24 |
发明(设计)人: | 马贵军;张震;石海芳;张丽;刘自立;张新廉;姬明放;俞爱敏 | 申请(专利权)人: | 申联生物医药(上海)股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 31236 上海汉声知识产权代理有限公司 | 代理人: | 郭国中 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 口蹄疫抗原 吸收峰 电导 标准溶液 关联公式 口蹄疫病毒 抗原 配置 | ||
1.一种口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
A、配置不同电导、不同抗原浓度的口蹄疫抗原标准溶液样品,测定各标准溶液样品的HPLC吸收峰面积,获得口蹄疫抗原浓度与HPLC吸收峰面积及电导之间的关联公式;
B、对待测口蹄疫抗原样品的电导进行测定;
C、对待测口蹄疫抗原样品的HPLC吸收峰面积进行测定;
D、根据步骤A的关联公式,通过步骤B和C测定的电导和HPLC吸收峰面积对口蹄疫抗原浓度进行计算,即得口蹄疫抗原浓度;
步骤A中,所述关联公式为:
C=(a×I+b)×PA+c×I+d
其中,C为抗原浓度,单位为μg/ml,I为样品电导,单位为mS/cm,PA为吸收峰面积,单位为mAU×s;所述a,b,c,d为常数。
2.根据权利要求1所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,步骤A中,所述配置的标准溶液样品数量不少于9个。
3.根据权利要求1所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,所述a,b,c,d分别为a=-1.71×10-5;b=0.0567;c=1.57×10-4;d=0.517。
4.根据权利要求1所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,步骤C中,所述测定HPLC吸收峰峰面积时,采用的色谱柱为Agilent Bio SEC系色谱柱。
5.根据权利要求4所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,所述色谱柱为AgilentBio SEC-5。
6.根据权利要求4或5所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,所述Agilent BioSEC系色谱柱填充的硅胶填料的粒径为3~6μm,孔径
7.根据权利要求4所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,所述采用Agilent BioSEC系色谱柱进行测定的条件为:流动相为含0.1M硫酸钠的磷酸缓冲液,其pH为7.2;流速为1ml/min;进样量为100μl;检测波长259nm。
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