[发明专利]一种口蹄疫抗原的定量方法有效

专利信息
申请号: 201710796728.3 申请日: 2017-09-06
公开(公告)号: CN109387581B 公开(公告)日: 2020-01-24
发明(设计)人: 马贵军;张震;石海芳;张丽;刘自立;张新廉;姬明放;俞爱敏 申请(专利权)人: 申联生物医药(上海)股份有限公司
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02
代理公司: 31236 上海汉声知识产权代理有限公司 代理人: 郭国中
地址: 200241 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 口蹄疫抗原 吸收峰 电导 标准溶液 关联公式 口蹄疫病毒 抗原 配置
【权利要求书】:

1.一种口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

A、配置不同电导、不同抗原浓度的口蹄疫抗原标准溶液样品,测定各标准溶液样品的HPLC吸收峰面积,获得口蹄疫抗原浓度与HPLC吸收峰面积及电导之间的关联公式;

B、对待测口蹄疫抗原样品的电导进行测定;

C、对待测口蹄疫抗原样品的HPLC吸收峰面积进行测定;

D、根据步骤A的关联公式,通过步骤B和C测定的电导和HPLC吸收峰面积对口蹄疫抗原浓度进行计算,即得口蹄疫抗原浓度;

步骤A中,所述关联公式为:

C=(a×I+b)×PA+c×I+d

其中,C为抗原浓度,单位为μg/ml,I为样品电导,单位为mS/cm,PA为吸收峰面积,单位为mAU×s;所述a,b,c,d为常数。

2.根据权利要求1所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,步骤A中,所述配置的标准溶液样品数量不少于9个。

3.根据权利要求1所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,所述a,b,c,d分别为a=-1.71×10-5;b=0.0567;c=1.57×10-4;d=0.517。

4.根据权利要求1所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,步骤C中,所述测定HPLC吸收峰峰面积时,采用的色谱柱为Agilent Bio SEC系色谱柱。

5.根据权利要求4所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,所述色谱柱为AgilentBio SEC-5。

6.根据权利要求4或5所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,所述Agilent BioSEC系色谱柱填充的硅胶填料的粒径为3~6μm,孔径

7.根据权利要求4所述的口蹄疫抗原的定量方法,其特征在于,所述采用Agilent BioSEC系色谱柱进行测定的条件为:流动相为含0.1M硫酸钠的磷酸缓冲液,其pH为7.2;流速为1ml/min;进样量为100μl;检测波长259nm。

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