[发明专利]真菌快速保存方法有效
| 申请号: | 201710796139.5 | 申请日: | 2017-09-06 |
| 公开(公告)号: | CN107674838B | 公开(公告)日: | 2020-10-30 |
| 发明(设计)人: | 吴波明;郭芳芳;王宁;孙秋玉;阳威 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
| 主分类号: | C12N1/04 | 分类号: | C12N1/04;C12R1/645 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;黄爽 |
| 地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 真菌 快速 保存 方法 | ||
1.真菌保存方法,其特征在于,采用改进的滤纸片法保存真菌,包括以下步骤:
1)将滤纸片用虚线刀划间隔0.3cm-0.5cm的方格虚线,然后根据培养皿直径大小,将滤纸片剪裁成与培养皿直径大小相匹配的圆形、方形或多边形,并在剪裁好的滤纸片中央开设直径为0.3cm-0.5cm的圆孔或边长为0.3cm-0.5cm的方形孔,完成滤纸片制作;高温灭菌;
2)配制培养基,灭菌后将培养基分装在培养皿中,待培养基凝固后,将上述制作好的滤纸片贴在培养基上,将菌丝块放在培养基中央,密封后置于培养箱中培养;
3)菌丝长满培养基后回收滤纸片,放入硫酸纸袋内,干燥后保存于-20℃冰箱;
所述真菌选自稻瘟菌(Pyricularia oryzae)、白绢病菌(Sclerotium rolfsii)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、小麦纹枯病菌(Rhzoctonia solani)。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,整个操作在无菌条件下完成。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)具体为:菌丝长满培养基后回收滤纸片,放入硫酸纸袋内,封口,置于超净工作台干燥,然后放在干燥器中室温干燥;干燥后取出硫酸纸袋,放入信封内,为了长期保存,在信封内放适量干燥剂,信封装入塑料密封袋中,置于-20℃保存,并定期更换干燥剂。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、将滤纸片用虚线刀划间隔0.3cm×0.3cm的方格虚线,然后将滤纸片剪裁成4cm×4cm的虚线大纸片,并在纸片中央开设直径为0.5cm×0.5cm的方形孔,完成滤纸片制作;高温灭菌;
S2、配制燕麦西红柿琼脂培养基,灭菌后将培养基分装在培养皿中,待培养基凝固后,将上述制作好的纸片贴在直径6cm的培养基上,将菌丝块放在培养基中央,密封后置于25℃培养箱中培养;
S3、菌丝长满培养基后回收纸片,放入8cm×12cm硫酸纸袋内,封口,置于超净工作台干燥2h,然后放在干燥器中室温干燥7d;干燥后取出硫酸纸袋,放入信封内,为了长期保存,在信封内放适量干燥剂,信封装入塑料密封袋中,置于-20℃保存,并定期更换干燥剂。
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