[发明专利]经生物工程改造的同种异体瓣膜

权利要求书

1.一种静脉中瓣膜的再细胞化的方法，其包括引入包含内皮细胞祖细胞和平滑肌细胞祖细胞的血液至经脱细胞化的静脉的管腔，以及在经脱细胞化的静脉的管腔中培养细胞，从而再细胞化静脉中的瓣膜。

2.根据权利要求1所述的方法，其中血液是外周静脉血或全血。

3.根据权利要求2所述的方法，其中外周静脉血或全血是通过注射或灌注引入至经脱细胞化的静脉。

4.根据权利要求3所述的方法，其进一步包括通过内皮细胞培养基和平滑肌细胞培养基的灌注培养细胞。

5.根据权利要求4所述的方法，其中内皮细胞培养基和平滑肌细胞培养基的灌注是交替的。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中经再细胞化的瓣膜是CD31阳性的，vWF阳性的，平滑肌肌动蛋白阳性的，且具有细胞核。

7.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中经再细胞化的瓣膜具有在第一峰承受的力是或者高于0.8N的力学性能。

8.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中经再细胞化的瓣膜具有等于或小于0.5秒的闭合时间。

9.一种静脉的带瓣段的再细胞化的方法，该方法包括：

a)脱细胞化静脉，其中该静脉对有治疗慢性静脉功能不全、深静脉血栓、和/或腿部溃疡需要的受试者为同种异体的；

b)从受试者收集血液，其中该血液包含内皮细胞祖细胞和平滑肌细胞祖细胞；

c)用收集的血液灌注经脱细胞化的静脉；以及

d)在经脱细胞化的静脉的管腔中培养细胞；从而再细胞化该静脉的带瓣段。

10.根据权利要求9所述的方法，其中血液是外周静脉血或全血。

11.根据权利要求10所述的方法，其中外周静脉血或全血是通过注射或灌注引入至经脱细胞化的静脉。

12.根据权利要求11所述的方法，其进一步包括通过内皮细胞培养基和平滑肌细胞培养基的灌注培养细胞。

13.根据权利要求12所述的方法，其中内皮细胞培养基和平滑肌细胞培养基的灌注是交替的。

14.根据权利要求9至13中任一项所述的方法，其中经再细胞化的瓣膜是CD31阳性的，vWF阳性的，平滑肌肌动蛋白阳性的，且具有细胞核。

15.根据权利要求9至13中任一项所述的方法，其中经再细胞化的瓣膜具有在第一峰承受的力是或者高于0.8N的力学性能。

16.根据权利要求9至13中任一项所述的方法，其中经再细胞化的瓣膜具有等于或小于0.5秒的闭合时间。

17.通过权利要求9所述的方法再细胞化的静脉在制备在有需要的受试者中治疗慢性静脉功能不全CVI、深静脉血栓DVT、和/或腿部溃疡的经生物工程改造的带瓣静脉中的用途。

18.根据权利要求17所述的用途，其中腿部溃疡是复发性的且由于深静脉返流和/或静脉高压引起。

19.一种带瓣静脉中瓣膜的再细胞化的方法，其中经再细胞化的瓣膜是功能性瓣膜，该方法包括：

a)脱细胞化带瓣静脉；

b)从有功能性瓣膜需要的受试者收集血液，其中该血液包含内皮细胞祖细胞和平滑肌细胞祖细胞；

c)用收集的血液灌注经脱细胞化的带瓣静脉；以及

d)在经脱细胞化的带瓣静脉中培养细胞；从而再细胞化该静脉中的瓣膜，其中所述的经再细胞化的瓣膜是功能性的。

20.根据权利要求19所述的方法，其中再细胞化恢复经再细胞化的瓣膜的能力以及返流压力的耐受性。

21.根据权利要求19所述的方法，其中血液是外周静脉血或全血。

22.根据权利要求21所述的方法，其中外周静脉血或全血是通过注射或灌注引入至经脱细胞化的静脉。

23.根据权利要求22所述的方法，其进一步包括通过内皮细胞培养基和平滑肌细胞培养基的灌注培养细胞。

24.根据权利要求23所述的方法，其中内皮细胞培养基和平滑肌细胞培养基的灌注是交替的。