[发明专利]一种护肤品的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种护肤品的其制备方法，特别地涉及一种利用植物为发生器制造生物活性物质作为抗衰老因子添加入护肤品的方法。

背景技术

表皮由多层上皮细胞组成，对环境和刺激起到保护屏障作用。表皮既是在基底层内部发生的细胞增生的场所，还是在中间层细胞分化的场所，最终形成一种完全分化的保护结构，即角质层。表皮主要由角质形成细胞组成，这些细胞在表皮的最深层增生，然后开始分化，并从表皮的深层迁移到表面，完成该循环大概需要20天。该过程对应于多种特定基因按照一定的顺序和协调的方式接连地被激活、随后被抑制的表达。

随着生物学，特别是分子生物学技术的发展，给美容化妆品行业带来了全新的发展机遇，护肤品已经从精细化工美容、植物美容向生物美容、基因美容发展。生物护肤品的主要成分生物活性多肽大部分是细胞生长因子，它们在体内含量极微，但生物活性极高，对多种细胞生理功能和代谢活动发挥生物调节作用，直接、间接地影响多种类型细胞的生长、分裂、分化、增殖和迁移，在美容护肤、整形外科、烧伤溃疡以及各种皮肤病的伤口修复与愈合中有重要作用。

生物活性物质微RNA(miRNA，miRNA)是一类在转录后水平上通过与靶基因mRNA的3'-非翻译区(untranslated regions，UTR)结合后调控基因表达的小分子非编码RNA。在细胞衰老中都发现有miRNA的异常表达，并且这些miRNA在细胞衰老的发生过程中扮演着重要的角色。

本发明采用微阵列芯片技术筛选表皮细胞衰老过程中的差异miRNA并进行功能分析，首次发现并提供了与表皮细胞衰老相关的miRNA，并提供了所述含有抗衰老生物活性物质的护肤品的制备方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种护肤品组合物及其制备方法。

为实现上述目的，一种制备护肤品的方法，包括向护肤品中添加生物活性物质。

进一步地，所述生物活性物质为miRNA。

更进一步地，所述制备护肤品的方法具体步骤如下：

步骤1、构建在植物中稳定表达miRNA的载体，构建miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355表达的骨架载体，针对miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355序列设计引物，利用重叠PCR扩增方法获得miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355的前体序列，最后将miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355的前体序列克隆到植物表达载体中表达；

步骤2、鉴定出阳性质粒并转化农杆菌，栽培无菌苗，利用农杆菌侵染法获得植物愈伤，在诱芽培养基以及幼苗诱根培养基上培养植物愈伤至转化植株，检测确定转化植株中获得的miRNA为miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355，获得了含有与表皮细胞抗衰老相关的miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355的植物，大面积种植含有与表皮细胞抗衰老相关的miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355的植物，获得与抗衰老护肤品相关的生物活性物质miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355；

步骤3、制备护肤品基质，包括油相A与水相B，将油相部分加热至82摄氏度，水相部分加热至96摄氏度，高压灭菌，冷却到82摄氏度，将油相加入至水相中并同时搅拌至乳化生成护肤品基质；

步骤4、制备抗衰老护肤品，成分比例如下：原料及配比为护肤品基质1份，miRNA-134为0.1份，miRNA-1207为0.1份，miRNA-720为0.1份，乳化基质冷却至33摄氏度以下加入miRNA共0.3份，搅拌至混匀，获得护肤品混合物。

优选地，所述植物包括但不限于：禾本科、蕨科、菊科、唇形科、百合科、石蒜科、伞形科、十字花科、豆科、葫芦科或其组合。

进一步地，所述植物为十字花科植物。

更进一步地，所述植物为拟南芥。

优选地，所述诱芽培养基为以MS培养基为基本培养基并附加0.5mg/L6-苄基腺嘌呤和0.1mg/Lα-萘乙酸的培养基。