[发明专利]一种金纳米粒子-石墨烯量子点手性二聚体的制备方法

权利要求书

1.一种金纳米粒子-石墨烯量子点手性二聚体的制备方法，其特征在于包括18nm金纳米粒子的合成，5nm石墨烯量子点的合成，金纳米粒子和石墨烯量子点分别修饰互补的DNA分子，金纳米粒子和石墨烯量子点形成二聚体结构，二聚体的透射电子显微镜表征和手性信号的测定；

所述的18nm金纳米粒子的合成步骤为：首先将200mL的锥形瓶用王水浸泡过夜，然后用超纯水清洗干净，加入95.5mL超纯水于锥形瓶中，再加入2.5mL质量浓度为0.4%的氯金酸溶液，将其置于加热磁力搅拌器上加热至沸腾，持续沸腾15min后，再在加热搅拌的状态下迅速加入2mL质量浓度为1%的柠檬酸三钠溶液，待溶液由无色变为酒红色后持续加热5min，停止加热后继续搅拌至溶液冷却至室温；

所述的5nm石墨烯量子点的合成步骤为：将氧化石墨烯在氮气保护的作用下300℃加热3h，从而得到热还原的石墨烯片，称取80mg石墨烯片加入到含有10mL浓H₂SO₄和30mL浓HNO₃的混合酸溶液中过夜超声，加入500mL的蒸馏水稀释，用0.22μm的微孔滤膜过滤除去酸溶液，再用蒸馏水清洗3次，最后将滤饼用50mL超纯水重悬，并用NaOH溶液调节pH至8.0，将其置于高压反应釜中，200℃的条件下加热反应12h，冷却至室温后，将溶液再次用0.22μm的微孔滤膜过滤除去大块的石墨烯片，收集滤液，将滤液避光条件下透析3次，从而得到石墨烯量子点溶液；

所述的金纳米粒子修饰DNA1的步骤为：将新合成的金纳米粒子在8000r/min的条件下离心7min，然后用pH7.2的0.01M PBS缓冲液将金纳米粒子进行重悬，并浓缩两倍，测得金纳米粒子的浓度为10nM，然后加入终浓度为30nM的DNA1，在室温下孵育6h后，将纳米粒子在7000r/min的条件下离心10min，去除上清，用pH8.0的0.01M TE缓冲液将纳米粒子进行重悬，得到DNA1修饰的金纳米粒子；

DNA1的序列为：5’-NH₂-AAAAAATGGCATGCC-3’；

所述的石墨烯量子点修饰DNA2的步骤为：将5nm石墨烯量子点在12000r/min的条件下离心10min，然后用pH6.5 0.01M MES缓冲液将石墨烯量子点重悬，测得石墨烯量子点的浓度为10nM，然后加入N-羟基琥珀酰亚胺和碳二亚胺，使得石墨烯量子点、N-羟基琥珀酰亚胺、碳二亚胺反应的摩尔比为1: 400:1000，在室温下振荡反应2h使得石墨烯量子点的羧基进行活化，然后离心去除上清，用pH7.2的0.01M PBS缓冲液将石墨烯量子点进行重悬，加入DNA2使得其终浓度为30nM，在室温下振荡反应4h后，12000r/min的条件下离心10min，用pH8.0的0.01M TE缓冲液将纳米粒子进行重悬，得到DNA2修饰的石墨烯量子点；

DNA2的序列为：5’-NH₂-AAAAAGGCATGCCAT-3’；

所述的金纳米粒子和石墨烯量子点形成二聚体结构的步骤为：将制备的DNA1修饰的金纳米粒子和DNA2修饰的石墨烯量子点等体积混合，在室温下孵育2h，使得金纳米粒子上的DNA1和石墨烯量子点上的DNA2互补杂交。