[发明专利]一种发酵乳杆菌优化培养基及其培养方法

说明书

本发明公开一种发酵乳杆菌优化培养基，包括如下组分，酵母蛋白胨13.0～30.0g/L、葡萄糖15.0～35.0g/L、蔗糖8.0～16.0g/L、乳糖15.0～35.0g/L、酵母浸出物8.0～12.0g/L、乙酸钠3.0～8.0g/L、硫酸镁0.02～0.1g/L、吐温80 0.5～0.75g/L、磷酸二氢钾1.5～3.0g/L、低聚异麦芽糖1.5～3.0g/L、柠檬酸1.8～4.0g/L、余量为无菌水。通过利用该优化培养基可达到发酵乳杆菌增殖培养、活菌数量大、菌体收率高的目的。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种发酵乳杆菌优化培养基及其培养方法。

背景技术

在人的肠道中存在着几百种、数百亿个细菌，在肠内构成菌丛。迄今为止，人们已知这些肠道细菌分三类：一类是能够合成某些维生素、对有害细菌的增殖有抑制作用、对免疫功能有刺激和促进的效果，这就是以双歧杆菌和乳杆菌为主的有益菌，这些细菌通过调整肠道生态系统可保持人体的健康，减少疾病，延缓衰老，因此被称为益生菌；另一类是在肠道内会构成腐败、产生有害或致癌物质的有害菌，如梭状芽胞杆菌、拟杆菌属和真细菌属等；另外还有一类既有有害作用，又有有益作用的细菌，如胨球菌。

2011年发酵乳杆菌列入我国《可用于食品的菌种名单》，2016年发酵乳杆菌列入《可用于婴幼儿食品的菌种名单》。发酵乳杆菌广泛分布于植物以及动物的胃肠道中，是宿主肠道、口腔和阴道的的正常菌群，能在人体胃液低pH和肠道高胆汁酸环境中存活，能够调节宿主体内微生物菌群的平衡，改善宿主体内系统环境，对宿主健康具有促进作用。

发酵乳杆菌属于乳杆菌科中的乳杆菌属，革兰氏阳性，兼性厌氧。菌种为棒状，直径0.5～0.9μm，长度的差异比较大，大多数是单个生长，也有成对出现。在MRS琼脂培养基生长时，菌落直径约1mm，有光泽、圆顶形、不透明，并且当用接种环接触时显示有粘性；不产芽孢，过氧化氢酶阴性，非运动性，能利用葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖、蜜二糖、果糖、核糖、海藻糖、棉子糖、甘露糖和L-阿拉伯糖产酸；接触酶阴性、明胶液化阴性、硫化氢试验阴性、淀粉水解阴性、产氨阴性、硝酸还原阴性、V.P.反应阴性，是人类肠道中主要的异型发酵乳杆菌，对胃酸、胆汁和胰腺分泌物具有很强的耐受性，发酵碳水化合物的能力强，在食品发酵和医疗保健领域的应用前景广泛。因此，提供一种活菌数量大、收率高、成本低的发酵乳杆菌的优化培养基及其培养方法是非常重要的。

发明内容

本发明目的是提供一种发酵乳杆菌优化培养基及其培养方法，达到发酵乳杆菌增殖培养、活菌数量大、菌体收率高的目的。

本发明采用的技术方案为：

一种发酵乳杆菌优化培养基，包括如下组分，酵母蛋白胨13.0～30.0g/L、葡萄糖15.0～35.0g/L、蔗糖8.0～16.0g/L、乳糖15.0～35.0g/L、酵母浸出物8.0～12.0g/L、乙酸钠3.0～8.0g/L、硫酸镁0.02～0.1g/L、吐温80 0.5～0.75g/L、磷酸二氢钾1.5～3.0g/L、低聚异麦芽糖1.5～3.0g/L、柠檬酸1.8～4.0g/L、余量为无菌水。

所述发酵乳杆菌优化培养基的制备方法，按照配方比例称量各组分，混合、加热溶解，用1mol/L食品级NaOH溶液调培养基pH值至6.30～6.80，115℃下灭菌30min，得发酵乳杆菌优化培养基。

所述发酵乳杆菌优化培养基的培养方法，包括如下步骤：

1)菌种划线培养：将发酵乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，于MC培养基上分区划线，划线结束后，平皿倒置，35℃培养箱恒温培养40～72小时；

2)一级纯化培养：挑取平皿上溶钙圈较大的单菌落接种至装有MRS液体培养基的试管中，试管密封，35℃培养箱恒温静置培养15～20小时；