[发明专利]一种南瓜子的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱

说明书

一种南瓜子的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱，涉及一种南瓜子指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。本发明的目的是提供一种南瓜子的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。本发明方法为：一、制备供试品溶液；二、制作指纹图谱，将供试品溶液注入高效液相色谱仪；本发明南瓜子的指纹图谱有15个共有特征峰，这些共有特征峰构成了南瓜子的指纹特征，可作为南瓜子的标准指纹图谱。本发明具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好、易于实现的特点。本发明南瓜子标准指纹图谱的用途是指南瓜子指纹图谱作为标准指纹图谱用于南瓜子药材的真伪、产地和品质的鉴别和质量控制。本发明应用于医药领域。

技术领域

本发明涉及一种南瓜子指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。

背景技术

南瓜子(Semen Moschatae)是葫芦科南瓜属植物南瓜Cucurbita moschata Duch.的种子。又称南瓜仁、白瓜子、金瓜子。含有丰富的不饱和脂肪酸、谷固醇、磷脂、单糖类、维生素、蛋白质、胡萝卜素以及锌、镁、铁等人体所必需的营养元素。具有驱除寄生虫、降低低密度脂蛋白胆固醇、抗炎、抗氧化、缓解高血压等作用，毒性很小。南瓜子中含有大量磷脂，经常吃南瓜子可防止矿物质在人的尿道系统凝结，使之随尿排出体外，可以预防肾结石的发生。更重要的是，南瓜子中的活性成分和丰富的锌元素，对前列腺有保健作用，经常吃南瓜子，对预防和改善男子前列腺疾病具有很好的药用功效。南瓜子同时也是一味药食两用的中药。我国南瓜种植范围很广，种类繁多，南瓜子资源丰富，已被公认为特效保健食品，具有十分广阔的开发利用前景。由于中药的产地、来源、采收季节、加工方法等情况复杂，需要采用更科学、合理的方法控制其质量，这对保证临床用药的安全有效是十分必要的。指纹图谱作为从整体上对中药进行质量控制的一种技术目前已被广泛认可，其优势比起单一组分甚至多组分定性定量方法更加明显。目前文献中尚未见到关于南瓜子指纹图谱的研究报道，因此，为科学有效地控制其内在质量，有必要建立南瓜子的指纹图谱。

发明内容

本发明的目的是提供一种南瓜子的高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。

本发明南瓜子的高效液相色谱指纹图谱的建立方法，是按以下步骤进行：

一、供试品溶液的制备：a、取南瓜子药材，粉碎后加入10倍量的石油醚，回流3次，每次2～3h；将残渣晾干后，加入10倍量的质量百分浓度为95％的乙醇，回流2次，每次2～4h，合并每次所得溶液，过滤，减压浓缩至干，得浸膏；

b、将浸膏用少量蒸馏水溶解后上到大孔树脂色谱柱上，先用蒸馏水洗涤4个柱体积，再用质量浓度为30％的乙醇洗脱4个柱体积，收集洗脱液，然后减压浓缩洗脱液至干，得到干燥固体C；

c、将步骤b得到的干燥固体C，用色谱甲醇溶解成浓度为1～2mg/mL的溶液，用微孔滤膜进行过滤，滤液即为供试品溶液；

二、指纹图谱的制作：将步骤一得到的供试品溶液注入高效液相色谱仪，以体积比为1:1的甲醇和乙腈的混合溶液为A相，以体积比为0.2:(100～105)的磷酸和水的混合液为B相进行梯度洗脱；其中，高效液相色谱条件为：色谱柱填料Thermo C18，规格为250×4.6mm，5μm；柱温为35℃；流速0.8mL/min，检测波长264nm，进样量10μL；在此条件下分析供试品溶液，得到南瓜子的指纹图谱；