[发明专利]一种小金制剂的HPLC指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种小金制剂的HPLC指纹图谱检测方法，所述小金制剂由以下重量份数的原料制成：人工麝香1-20份、草乌40-60份、乳香20-40份、五灵脂40-60份、地龙40-60份、木鳖子40-60份、枫香脂40-60份、没药20-40份、当归20-40份、香墨1-10份，其特征在于该检测方法包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：将待测小金制剂研细，取0.5-5重量份，加入水饱和的正丁醇10-100体积份，称定重量，回流提取后放冷至室温，再称定重量，用水饱和的正丁醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜过滤，取续滤液，备用；

(2)精密吸取供试品溶液5-20μl，上高效液相色谱仪进行检测，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为254nm，所述高效液相色谱仪的固定相为C₁₈色谱柱，流动相为甲醇与0.1％磷酸溶液的混合溶液，采用梯度洗脱，流速为0.5-2ml/min，柱温为25～40℃，理论板数不低于10000；

所述梯度洗脱中，各时间段及流动相中0.1％磷酸溶液相的体积比分别为：0～2min，磷酸溶液相70％；2～20min，磷酸溶液相70→45％；20～50min，磷酸溶液相45→25％；50～70min，磷酸溶液相25→20％；70～85min，磷酸溶液相20→15％；85～90min，磷酸溶液相15→5％；90～120min，磷酸溶液相5→0％；

(3)记录供试品溶液0～120min的色谱图，利用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对供试品溶液的色谱图分别经过数据导入、多点矫正和数据匹配，即得指纹图谱并进行相似度分析，

所述重量份与所述体积份的关系为g/mL，

所述供试品溶液的色谱图中有20个共有特征峰，其中1号峰为人工麝香特有峰、4号峰为枫香脂特有峰、8号和14号峰为乳香特有峰、9号峰为五灵脂特有峰、15号和18号峰为没药特有峰，以枫香脂和没药的共有峰13号峰为参比峰，各峰的相对保留时间分别为，1号峰为5.997min，4号峰为18.900min，8号峰为38.318min，9号峰为45.058min，13号峰为59.838min，14号峰为69.005min，15号峰为76.934min，18号峰为90.353min。