[发明专利]RNA‑CRNDE抑制剂磁性靶向载药微球在制备治疗肝癌药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及药学领域，尤其是一种RNA-CRNDE抑制剂磁性靶向载药微球在制备治疗肝癌药物中的应用。

背景技术

HCC是起源于肝脏上皮或者间叶组织的恶性肿瘤，HCC是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，位于我国恶性肿瘤死亡率排行第二位，发病早期患者大多无特异性症状，中晚期则出现肝区疼痛、腹胀、乏力、消瘦以及进行性肝肿大等症状。近年来，HCC发病率及死亡率呈现明显上升趋势，严重威胁了人类的身体健康及生命安全。HCC发病机制复杂，目前临床上仍缺乏有效的治疗性药物，手术切除后仍存在较大的复发率风险，因此寻找新的治疗靶点是目前治疗HCC亟待解决的主要问题。LncRNA是目前肿瘤诊断及治疗的研究新前沿，研究表明，LncRNA CRNDE基因在人类胶质瘤、结直肠癌等多种肿瘤中表达异常，提示其可能参与肿瘤发生及发展。目前，国内外有关HCC中LncRNA CRNDE基因表达及其临床意义的研究几乎没有。

发明内容

本发明的目的是：提供一种RNA-CRNDE抑制剂磁性靶向载药微球在制备治疗肝癌药物中的应用，它对肝癌细胞具有显著的抑制作用。

本发明是这样实现的：RNA-CRNDE抑制剂磁性靶向载药微球在制备治疗肝癌药物中的应用。

RNA-CRNDE抑制剂磁性靶向载药微球作为唯一有效成分。

将RNA-CRNDE抑制剂磁性靶向载药微球与药学上可接受的辅料制备成药学上可接受的剂型。

为了验证本发明的实验效果，进行了以下体内实验：

1方法

引物及内参基因引物由上海生工有限公司合成。

1.1方法

采用Trizol法提取肝癌组织及癌旁组织总RNA，所提RNA经OD测定，OD260/OD280比值均在1.8～2.0，说明所提RNA为高纯度的RNA，没有蛋白质和DNA残留。28s和18s两条条带亮度比值基本符合比值2:l，提示所提RNA完整性好，无降解(见图1)。按照反转录试剂盒进行反转录。Real-Time RT-PCR引物序列如表1所示。RT-PCR反应选用SYBR PrimeScript RT-PCR Kit miRNA定量扩增体系进行，RT-PCR仪进行反应体系扩增。反应总体积10μL：cDNA 1μL，SYBR Primix Ex Taq TM 5μL，引物0.4μL，RNase H₂O up to 10μL。RT-PCR反应条件为：95℃预变性15min，95℃30s，65℃20s，72℃30s进行30个循环。以GAPDH为内参，每个样品均设置3个复孔，结果采用2^-ΔΔCT方法处理，其中ΔΔCT＝(CT_{LncRNA CRNDE}-CT_GAPDH)_肝癌组织-(CT_{LncRNA CRNDE}-CT_GAPDH)_癌旁组织。

表1LncRNA CRNDE Real-Time RT-PCR扩增引物序列

1.2统计学分析

利用统计学软件SPSS 19.0进行研究数据统计学分析，计量资料用均数±标准差表示，两两比较采用t检验，计数资料采用卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1肝癌组织与癌旁组织中LncRNA CRNDE基因表达水平比较

肝癌组织中LncRNA CRNDE基因表达水平明显高于癌旁组织，差异有统计学意义(P＜0.05)。具体结果见表1。

表1肝癌组织与癌旁组织中LncRNA CRNDE基因表达水平比较

2.2肝癌组织LncRNA CRNDE表达与肝癌临床病理特征之间的关系