[发明专利]一种胎牛血清替代物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种胎牛血清替代物及其制备方法和应用，通过在去除蛋白的成牛血清中加入特定的化合物，得到了良好的胎牛血清替代替物。本发明的胎牛血清替代物用于细胞培养时，细胞的生长状态良好，与使用胎牛血清基本一致。胎牛血清替代物具有较好的批间稳定性，不同批次的胎牛血清替代物的培养基对细胞的培养无显著影响。本发明的胎牛血清替代物，生产和使用成本相对较低，价格波动较小。

技术领域

本发明涉及一种生物制品，特别涉及一种胎牛血清替代物及其制备方法和应用。

背景技术

动物血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成分，常用于动物细胞的体外培养。

动物血清主要包括胎牛血清、小牛血清、成牛血清、马血清、羊血清、鸡血清、兔血清等，其中以胎牛血清的使用最为普遍。动物血清在细胞培养中提供细胞增殖所需的生长因子、激素、转移蛋白、贴壁和铺展在培养基质上的因子、蛋白酶抑制剂和其他营养物质。使用血清的优点是血清含有促进细胞增殖和维持的大部分因子，它几乎是通用的生长添加物，适用于动物、人和昆虫细胞等的细胞培养。因而使用血清不需要为每一个细胞系优化培养基，节省了大量时间和精力。

血清中蛋白含量大且成分复杂(大于100种)，这使实验和生产的标准化都变得困难，也使疫苗、单克隆抗体及生物活性蛋白等用培养细胞生产的生物产品的下游分离和纯化变得更加复杂。干细胞培养要求在促进细胞增殖的同时，又要保持细胞的发育特性，不发生分化，这对细胞培养基组分的要求更加苛刻。而使用血清则可能改变细胞在体内的正常状态，可能促进某种细胞(成纤维细胞)生长的同时，抑制另一类细胞生长(表皮细胞)。在培养原代细胞时使用含血清的培养基可能无法阻止成纤维细胞过度增殖，而影响原代细胞的生长。

虽然血清含有促进细胞生长的成分，但同时也含有内毒素、血色素、补体、抗体等其他有害成分，影响细胞生长甚至导致细胞死亡。低质量的血清常被病毒、真菌和支原体等微生物感染。血清来源不稳定，可能受来源地区环境及牛群疾病影响导致供应紧张，造成价格波动。

胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体，取自剖腹产的胎牛。因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少，品质最高，相应的，其生产和使用成本也是极其高昂的。此外，胎牛血清的收集过程也一直遭到伦理学的质疑。因此，更符合人道的无血清细胞培养基或胎牛血清替代物值得到大力支持和推广。

发明内容

本发明的一个目的在于克服现有技术的不足，提供一种适用于细胞培养的胎牛血清替代物。

本发明的另一个目的在于提供一种胎牛血清替代物的制备方法。

本发明的再一个目的在于提供使用了上述胎牛血清替代物的培养基。

本发明所采取的技术方案是：

一种胎牛血清替代物，由去除蛋白的成牛血清和营养组分组成，各营养组分在去除蛋白沉淀的成牛血清中的终含量为：