[发明专利]一种检测脑炎病毒的引物组合及应用、试剂盒在审

专利信息
申请号: 201710759502.6 申请日: 2017-08-29
公开(公告)号: CN107299157A 公开(公告)日: 2017-10-27
发明(设计)人: 刘岚铮;杨国樑;韩秀云;吕燕;赵红;王春荣;关恒云 申请(专利权)人: 济南市疾病预防控制中心
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371 代理人: 李进
地址: 250000 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 脑炎 病毒 引物 组合 应用 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种检测脑炎病毒的引物组合,其特征在于,所述引物组合包括检测肠道病毒的第1引物对、检测乙脑病毒的第2引物对、检测单纯疱疹病毒的第3引物对中的至少一种以及通用引物对;所述第1-3引物对的碱基序列如SEQ ID No.1-6所示;所述通用引物对的碱基序列如SEQ ID No.7-8所示。

2.根据权利要求1所述的检测脑炎病毒的引物组合,其特征在于,所述第1-3引物对和所述通用引物对包括上游引物和下游引物;所述第1-3引物对的上游引物序列包括所述通用引物的上游引物序列,所述第1-3引物对的下游引物序列包括所述通用引物的下游引物序列。

3.如权利要求1或2所述的引物组合在制备检测脑炎病毒的试剂盒中的应用。

4.一种检测多种脑炎病毒的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括如权利要求1或2所述的引物组合。

5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,还包括PCR反应缓冲液、Taq DNA聚合酶、dNTPs和反转录酶中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述PCR反应缓冲液包括Tris·HCl、KCl、MgSO4和(NH4)2SO4。

7.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,还包括病毒RNA提取试剂。

8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述RNA提取试剂包括DNase溶液、无水乙醇、异丙醇和氯仿。

9.如权利要求4-8任一项所述的试剂盒在检测病毒RNA中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,包括以待检样本为模板,进行PCR反应;

PCR反应程序为:50-51℃逆转录30min;95-96℃,预变性15min;95-96℃变性30s,62-68℃复性45s,72-73℃延伸30s,10个循环;95-96℃,变性30s;52-58℃复性30s;72-73℃,延伸30s,30个循环。

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