[发明专利]产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖、提取及抗感染应用

说明书

本发明公开了产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖、提取及抗感染应用，所述肽聚糖从产丙酮酸棒状杆菌的细胞壁通过三氯乙酸法提取而得，所述产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖在抗革兰氏阳性菌感染或/和抗真菌感染上的应用。本发明所提供的单纯肽聚糖的作用可以减少产丙酮酸棒状杆菌全菌体的副作用；所提取的产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖（CP‑PGN）一定程度上可以延长感染小鼠的生存时间及增强其抗感染能力，对其感染具有良好的预防效果；另外，CP‑PGN能够阻止局部感染进展为系统感染，可有效的阻止感染范围的扩大；此外，在低剂量感染时，CP‑PGN还表现出与万古霉素（VA）相似的感染治疗效果，可作为一种抗生素万古霉素的替代品，临床应用前景良好。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖、提取及抗感染应用。

背景技术

产丙酮酸棒状杆菌（CP）是近年来新发现的一种棒状杆菌，研究表明CP能增加抗原的免疫原性和反应原性，促进树突状细胞的成熟和抗原提呈能力，具有一定的免疫调节作用，作为免疫调节剂，显示了良好的应用前景，然而产丙酮酸棒状杆菌作为一种菌体，其全菌体在实际应用过程中会产生一定副作用。

细菌细胞壁的共有成分-肽聚糖（PGN）也是一种较强的免疫增强剂，具有多种生物学活性，能刺激单核巨噬细胞和内皮细胞释放免疫调控物质，在调节宿主免疫功能方面发挥着重要作用，具有很好的研究和应用价值。

通常，细菌肽聚糖的提取方法主要是三氯乙酸法，但是由于不同细菌的肽聚糖的含量和结构不同，因此不同细菌肽聚糖提取过程中最佳的步骤顺序、试剂配比会有所不同，不同的方法提取的肽聚糖的得率、结构完整性也不相同，从而导致其发挥的作用及实际应用也存在一定的差别。因此，对不同细菌来源的肽聚糖，应当找到适合的肽聚糖提取方法以及探讨其合适的实际应用。

专利CN 103981232 A公开了一种功能性嗜酸乳杆菌肽聚糖，此研究表明该嗜酸乳杆菌肽聚糖能降低大肠杆菌脂多糖引起的炎症反应，为乳酸菌调节肠道免疫活性，调控相关免疫因子的释放来刺激免疫系统发挥其抗感染作用，开发乳酸菌新型保健因子、功能性食品或药品提供理论依据。然而，现有技术中，还未发现针对产丙酮酸棒状杆菌的肽聚糖（CP-PGN）的提取及其应用的研究。

发明内容

解决的技术问题：本发明针对以上至少一种技术问题，提供一种产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖、提取及应用，并通过验证肽聚糖的纯度，分析其结构以及构建其抗感染动物模型，对所提取的产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖的抗感染应用进行研究。

本发明采用的一种技术方案为：

产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖的抗感染应用，所述肽聚糖从产丙酮酸棒状杆菌的细胞壁通过三氯乙酸法提取而得，所述肽聚糖的重均分子量Mw为18774Da，所述产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖在抗革兰氏阳性菌感染或/和抗真菌感染上的应用。具体的，所述产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖可制作成相应的抗感染的药物制剂或饲料、保健品、食品等日化添加剂的应用。

上述的产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖的抗感染应用，所述产丙酮酸棒状杆菌的菌种编号为ATCC BAA-1742或CCUG 57046。

上述的产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖的抗感染应用，所述革兰氏阳性菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。

上述的产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖的抗感染应用，所述真菌为白色念珠菌。

上述的产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖的抗感染应用，所述产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖的提取步骤包括：收集产丙酮酸棒状杆菌菌体，先用10%的三氯乙酸溶液去除磷壁酸，再用8g/dl的SDS溶液和1mg/ml的胰蛋白酶缓冲液中去除蛋白质，最后用乙醚去除脂类，即得。

上述的产丙酮酸棒状杆菌肽聚糖的抗感染应用，所述去除蛋白质的具体步骤包括：先加入8g/dl的SDS溶液中并于沸水中搅拌，离心取沉淀后再加入1mg/ml的胰蛋白酶缓冲液震荡均匀，随后先低速离心取上清液，再高速离心取沉淀即可。