[发明专利]游离DNA的稳定剂和用于游离DNA检测的采血管有效
| 申请号: | 201710748533.1 | 申请日: | 2017-08-25 |
| 公开(公告)号: | CN107760673B | 公开(公告)日: | 2020-08-07 |
| 发明(设计)人: | 王国华;王金星;宋炜 | 申请(专利权)人: | 南通普惠精准医疗科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12M1/26;A61B5/154 |
| 代理公司: | 深圳市威世博知识产权代理事务所(普通合伙) 44280 | 代理人: | 李庆波 |
| 地址: | 226007 江苏省南*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 游离 dna 稳定剂 用于 检测 血管 | ||
1.一种血液中游离DNA的稳定剂,其特征在于,所述稳定剂由第一溶液和第二溶液组成,以使得所述血液中游离DNA在常温条件下稳定存储,与所述血液接触前,所述第一溶液与所述第二溶液独立存储;与所述血液接触后,所述第一溶液与所述第二溶液混合;
其中,所述第一溶液由第一缓冲液、第一抗凝剂、细胞稳定剂、代谢抑制剂和第一溶剂组成;所述第一缓冲液为碱性溶液,所述细胞稳定剂用于渗透进细胞内部使细胞内部中各个成分稳定;所述第一缓冲液为三羟甲基氨基甲烷-盐酸Tris-HCl缓冲液、所述第一抗凝剂为二水合乙二胺四乙酸二钠EDTANa2·2H2O、所述细胞稳定剂为十二烷基硫酸钠SDS、所述代谢抑制剂为右旋葡萄糖、所述第一溶剂为二甲基亚砜DMSO;所述Tris-HCl缓冲液的质量浓度为4.8-7.2g/L;所述EDTANa2·2H2O的质量浓度为2.97-4.46g/L;所述SDS的质量浓度为16-24g/L;所述右旋葡萄糖的质量浓度为8-12g/L;所述DMSO的质量浓度为0.08-0.12g/L;
所述第二溶液由第二缓冲液、第二抗凝剂、血液生物相容性试剂、游离DNA稳定剂和防腐剂组成;所述血液生物相容性试剂用于增加血液的生物相容性防止发生凝血,所述游离DNA稳定剂用于抑制细胞的裂解;所述第二缓冲液为甘油、所述第二抗凝剂为三氟柳、所述血液生物相容性试剂为β-环糊精、所述游离DNA稳定剂为色甘酸二钠和软磷脂、所述防腐剂为柠檬酸钾;所述甘油的质量浓度为0.8-1.2g/L;所述三氟柳的摩尔浓度为40-60μmol/L;所述β-环糊精的摩尔浓度为80-120μmol/L;所述色甘酸二钠的摩尔浓度为80-120μmol/L;所述软磷脂的质量浓度为2.4-3.6g/L;所述柠檬酸钾的质量浓度为0.4-0.6g/L。
2.根据权利要求1所述的稳定剂,其特征在于,
所述Tris-HCl缓冲液的质量浓度为6g/L;所述EDTANa2·2H2O的质量浓度为3.72g/L;所述SDS的质量浓度为20g/L;所述右旋葡萄糖的质量浓度为10g/L;所述DMSO的质量浓度为0.1g/L。
3.根据权利要求1所述的稳定剂,其特征在于,
所述甘油的质量浓度为1.0g/L;所述三氟柳的摩尔浓度为50μmol/L;所述β-环糊精的摩尔浓度为100μmol/L;所述色甘酸二钠的摩尔浓度为100μmol/L;所述软磷脂的质量浓度为3.0g/L;所述柠檬酸钾的质量浓度为0.5g/L。
4.一种用于血液中游离DNA检测的采血管,其特征在于,所述采血管包括:
采血管本体和密封膜囊,所述密封膜囊位于所述采集管本体内部,且设置于所述采集管本体的管口处,其中,所述采血管本体的管底处存储有权利要求1-3中任一项所述的第一溶液,所述密封膜囊内存储有权利要求1-3中任一项所述的第二溶液,所述第一溶液和所述第二溶液使得所述血液中游离DNA在常温条件下稳定存储,与所述血液接触前,所述第一溶液与所述第二溶液独立存储;与所述血液接触后,所述第一溶液与所述第二溶液混合。
5.根据权利要求4所述的采血管,其特征在于,所述采血管还包括:
胶塞,设置于所述采集管本体的所述管口处,所述胶塞与所述管口可拆卸连接;所述密封膜囊一端与所述胶塞面向所述采血管本体的一端连接;
保护帽,设置于所述胶塞外部。
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