[发明专利]一种珊瑚拟青霉菌种及其培育方法、应用

说明书

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种珊瑚拟青霉菌种及其培育方法、应用，该菌株的保藏编号为CGMCC 14129，本发明通过固体培养及液体培养后，筛选出的菌株具有旺盛的菌丝体生长能力，富含丰富的蛋白质、醌茜素、无机盐及多种多糖体，在保健和医药行业具有重要的作用，为肿瘤和抑郁症患者带来新的福音；本发明培养的菌株耐盐碱性提高。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种珊瑚拟青霉菌种及其培育方法、应用。

背景技术

珊瑚拟青霉最早于1887年被Solms-Laubach和Reink发现，广泛的在印度尼西亚等热带地区的柿子上发现。在中国台湾省收集到的pesudocordyceps seminicola自然生长的成熟子座上发现了子囊孢子。Penicilliopsis clavariaeformis AP结晶纯化得到的代谢产物penicilliopsin，是一种橘黄色的色素物质，分离提取得到醌茜素(skyrin(dediemodin(8,8’)）或大黄素(emodin）。Skyrin和emodin有抗抑郁或者抗肿瘤活性。近年来，具有抗抑郁和抗肿瘤作用的先导化合物一直是国内、外药物工作者寻找的热点。而最理想的有效成分来源途径是通过微生物发酵培养大规模生产低成本原料。现有技术中，我国大陆地区尚未发现珊瑚拟青霉菌种。本发明首次在中国大陆地区发现了珊瑚拟青霉新菌株。

发明内容

本发明提供了一种新的珊瑚拟青霉菌种。

本发明还提供了上述珊瑚拟青霉菌种的培育方法。

本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：

本发明提供了一种珊瑚拟青霉菌株，其保藏编号为CGMCC 14129。

本发明还提供了一种珊瑚拟青霉菌种的培育方法，包括以下步骤：

（1）制作母种 ：将第二年不能正常发芽的君迁子种子用75%酒精消毒2-3次，再切成小块放置于消毒好的PDA培养皿中，然后置于 25℃培养箱中恒温暗培养7d，直至长出黄绿色菌丝即得生产母种，再用试管培养基斜面保存；

（2）固体培养：将斜面保存的珊瑚拟青霉菌株，取小块接在新鲜的燕麦固体斜面培养基上，然后置25 ℃ 的恒温培养箱中培养7 d，将该菌种放入－4 ℃的冰箱内冷冻保存待用；

（3）液体培养：从燕麦固体培养基上挑选棒状菌丝接种与种子培养液中，置25℃控温摇床和150 r·min^-1的转速下培养3 d，备用。

进一步的，所述综合 PDA 斜面是由以下重量本分比的原料组成：马铃薯 20%、葡萄糖 2%、琼脂 2%、磷酸二氢钾 0.3%、硫酸镁 0.15%，其余为水 。

进一步的，所述燕麦斜面培养基是由燕麦40g、琼脂6 g、葡萄糖20g、蔗糖10 g、蛋白胨2 g 、磷酸二氢钾（KH₂PO₄）1 g、硫酸镁（MgSO₄）0.5 g、0.2g枸缘酸铵、25g橘汁及水组成。

进一步的，所述燕麦斜面培养基采用以下方法制备而成：称取重量份燕麦煮沸 30min，过滤，取其滤液按比例加入琼脂，待琼脂完全溶解，再加入葡萄糖、蔗糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、枸缘酸铵及橘汁，加水至 1000 m L后灭菌，温度降至室温时倒入试管中制备成为斜面。

进一步的，所述种子培养液是由以下重量百分比的原料组成：蔗糖3%、葡萄糖3%、酵母膏2%、蛋白胨1%、MgSO₄ 0.05%、KH₂PO₄0.1%、琼脂2%、余量为蒸馏水，PH值5.0--5.5。