[发明专利]一种糊粉层花青素合成型鲜食玉米参考系及其选育方法和应用

权利要求书

1.一种糊粉层花青素合成型鲜食玉米参考系的选育方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)在常规玉米种质中选择糊粉层富含花青素的玉米自交系与糊粉层无色的玉米自交系为亲本进行杂交，再连续自交七代，获得糊粉层无色的玉米自交系；

(2)利用R、B基因的核苷酸序列设计实时荧光定量PCR引物，对步骤(2)经杂交和多次自交获得的糊粉层无色的玉米自交系进行R/B基因表达量的测定，筛选仅携带R基因的R基因型玉米自交系和仅携带B基因的B基因型玉米自交系，作为糊粉层花青素合成型鲜食玉米参考系；其中，所述R基因型玉米自交系为含如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的R基因的糊粉层无色的玉米自交系，所述B基因型玉米自交系为含如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的B基因的糊粉层无色的玉米自交系。

2.根据权利要求1所述的一种糊粉层花青素合成型鲜食玉米参考系的选育方法，其特征在于，所述步骤(2)中，鉴定R基因的实时荧光定量PCR引物为：

SEQ ID NO.3：R-F：AGCGACGAGAGAAGCTCAAC

SEQ ID NO.4：R-R：TAGGCTATCGTTTCGGCGAG。

3.根据权利要求1所述的一种糊粉层花青素合成型鲜食玉米参考系的选育方法，其特征在于，所述步骤(2)中，鉴定B基因的实时荧光定量PCR引物为：

SEQ ID NO.5：B-F：CCATCCTCGCCGAAACGATA

SEQ ID NO.6：B-R：TGGAGCCCACACAGACTTTC。

4.一种利用糊粉层花青素合成型鲜食玉米参考系鉴定玉米自交系基因型的方法，其特征在于，所述参考系包括R基因型玉米自交系和B基因型玉米自交系，所述R基因型玉米自交系为含如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的R基因的糊粉层无色的玉米自交系，所述B基因型玉米自交系为含如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的B基因的糊粉层无色的玉米自交系，所述方法的步骤包括：

将R基因型玉米自交系和B基因型玉米自交系分别与待鉴定的玉米自交系进行杂交，若：

①与R基因型玉米自交系杂交的F0代种子为紫色，与B基因型玉米自交系杂交的F0代种子为无色，则该玉米自交系为B基因型自交系；

②与R基因型玉米自交系杂交的F0代种子为无色，与B基因型玉米自交系杂交的F0代种子为紫色，则该玉米自交系为R基因型自交系；

③与R、B基因型玉米自交系杂交的F0代种子均为无色，则不属于R、B任一基因型自交系。

5.一种利用糊粉层花青素合成型鲜食玉米参考系定向培育彩色玉米品种的方法，其特征在于，所述参考系包括R基因型玉米自交系和B基因型玉米自交系，所述R基因型玉米自交系为含如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的R基因的糊粉层无色的玉米自交系，所述B基因型玉米自交系为含如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的B基因的糊粉层无色的玉米自交系，所述方法包括以下步骤：

(Ⅰ)将参考系中的两种基因型的玉米自交系分别与常规玉米种质中的糊粉层无色的玉米自交系进行测配，根据F0代玉米籽粒糊粉层颜色的呈现，判定测配玉米自交系的基因型，筛选得到基因型为R型和B型的自交系品种；

(Ⅱ)将R型和B型的自交系进行杂交，即可得到糊粉层富含花青素的F0代种子，以及色素分离的F1代种子。