[发明专利]蛋白质溶液光学清晰度的测量方法、静注免疫球蛋白及其乳光的测量方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物制药领域，具体而言，涉及一种蛋白质溶液光学清晰度的测量方法、静注免疫球蛋白及其乳光的测量方法。

背景技术

2015版《中华人民共和国药典》对静注免疫球蛋白(pH4)外观的检定要求表述为“应为无色或淡黄色澄明液体，可带轻微乳光，不应出现浑浊”。控制制品的乳光是本版药典所提出的外观检定指标之一。现有对制品乳光程度的判断方法依靠人工在澄明度检测仪下进行肉眼判断，缺少定量评价方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种蛋白质溶液光学清晰度的测量方法、静注免疫球蛋白及其乳光的测量方法，其旨在提供一种新的蛋白质溶液光学清晰度的测量方法以及一种更加灵敏的静注免疫球蛋白乳光的测量方法。

本发明提供一种技术方案：

一种蛋白质溶液光学清晰度的测量方法，其包括：用分光光度计对蛋白质溶液的吸光度进行测定。

进一步地，用紫外分光光度计对蛋白质溶液的吸光度进行测定。

进一步地，用分光光度计测定310-320nm波长处蛋白质溶液的吸光度。

进一步地，用分光光度计测定318nm波长处蛋白质溶液的吸光度。

进一步地，上述蛋白质为免疫球蛋白。

进一步地，上述免疫球蛋白来源于人体血液。

本发明还提供一种技术方案：

一种静注免疫球蛋白乳光的测量方法，其包括用分光光度计对静注免疫球蛋白的吸光度进行测定。

进一步地，用分光光度计测定310-320nm波长处静注免疫球蛋白的吸光度。

进一步地，用分光光度计测定318nm波长处静注免疫球蛋白的吸光度。

本发明还提供一种技术方案：

一种静注免疫球蛋白，该静注免疫球蛋白在318nm波长处吸光度低于0.26。

本发明实施例提供的蛋白质溶液光学清晰度的测量方法、静注免疫球蛋白及其乳光的测量方法的有益效果是：

采用分光光度计可以对蛋白质的光学清晰度进行检测，并且检测得到的结果可信，且检测的灵敏度高。进一步地，在310-320nm波长处，蛋白质溶液对入射光的散射效应最强，可以更加灵敏的测定出蛋白质的光学清晰度的差异。是一种适合用于取代肉眼观察主观评价法作为定量评价蛋白质光学清晰度的检测方法。且本发明提供的蛋白质溶液光学清晰度的测量方法比浊度计的灵敏度更高。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为试验例1三个样品的全波长光谱吸收特征叠加分析图谱；

图2为试验例2中4号样品全波长扫描光吸收图谱；

图3为试验例2中5号样品全波长扫描光吸收图谱；

图4为试验例2中6号样品全波长扫描光吸收图谱。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

在低温乙醇沉淀工艺中，蛋白质沉淀后重溶操作易导致蛋白质在溶液中溶解分散不完全而产生多聚体；另外静注免疫球蛋白的病毒巴氏灭活步骤导致制品中部分蛋白质发生不完全热变性，蛋白质结构遭受热损伤，疏水核心暴露而产生聚集体，这些聚集体致使静注免疫球蛋白制品溶液产生乳光。蛋白质溶液的乳光程度与蛋白质浓度和溶液离子强度等也有关系。

现有技术中，使用垂直散射浊度计对蛋白质溶液乳光进行分析，垂直散射浊度计采用发射可见光的钨丝灯作为光源，光源覆盖波长400-900nm。浊度计设计原理主要为：测量溶液中粒径较大的可见异物引起的溶液浑浊度，溶液中颗粒物的直径对光线的散射消减有数量关系。

发明人发现，静注免疫球蛋白溶液中的蛋白质多聚体的粒径尺度为肉眼不可见的纳米级别。在可见光区粒径较小的蛋白质多聚体对可见光中波长最短的蓝光有较强的散射能力，所以静注免疫球蛋白制品在澄明度检测仪下显示淡蓝色乳光。进一步地，在波长更短的非可见光区，浊度计和肉眼都无法探测到光的散射现象，可能会忽略具有乳光特性制品的更为显著的光谱学特征。