[发明专利]血液中未知毒物的液相色谱-质谱筛查方法

说明书

本发明公开了一种血液中未知毒物的液相色谱‑质谱筛查方法：取待检测血液样品，加入乙腈沉淀蛋白，振荡，离心，取上清液，0.22μm微孔有机滤膜过滤，然后进行LC‑MS/MS分析，根据分析结果判断待检测血液样品中是否含有毒物成分；所用仪器选自AB公司ultraLC 100‑XL‑4000Q TRAP液质联用仪，或Agilent 1100液相色谱‑AB 3200 QTRAP三重串联四极杆质谱仪。本发明建立了不同类别毒物的检测方法，检测快速、准确，给出了常见毒物的检出限，确保各类目标物的高灵敏有效检验，为阴性检验结果提供了科学的数据支撑，继而为相关的临床诊断、抢救及刑事侦查、诉讼提供有力的科学依据。

技术领域

本发明涉及血液中未知毒物的液相色谱-质谱筛查方法，属于化学物质检测技术领域。

背景技术

常见毒物筛查在法庭科学理化检验中占据了相当大的比重。申请人通过调研山东省近10年来的涉毒案件，发现此类案件物证检验中存在以下问题：

(一)涉案毒物种类明显增多，在侦办某些是否中毒不明确的案件中，需要筛查的毒物不仅仅局限于某几种或某一类，即目标性不强。此种情况下，如果仍沿用老方法仅就几种最常见的毒物进行筛查，极有可能造成漏检。

(二)目前，气质联用法是全省各地市普遍掌握和采用的仪器分析方法，此方法相应的的样品前处理方法不规范，也未经过优化考查。

(三)气质联用法由于受仪器自身性能所限，不能对某些毒物进行高灵敏有效检验。各地市虽已陆续引进液质联用设备，但未能进行系统的方法开发，不能充分利用液质联用技术来提高毒物检测灵敏度。

(四)液质联用在毒物筛查中的应用虽见报道，但前处理步骤过于复杂，且所有分析物均在统一的液相条件下进行分析，效果并不理想。同时，由于仪器品牌、型号差异，相关条件和数据无法直接作为本省法庭科学毒物筛查依据。

(五)利用液质联用技术对涉案毒物的检出限进行系统性考查仍属空白，阴性结果评价缺乏科学的数据支撑。

鉴于以上情况，为满足新形势下公安工作的需求，有必要提供一种具有通用性的、操作简便的筛查方法。

发明内容

针对上述现有技术，本发明提供了一种血液中未知毒物的液相色谱-质谱筛查方法。本申请系统开展了农药(包括有机磷类、氨基甲酸酯类、菊酯类、有机氯类)、除草剂(包括酰胺类、杂环氧基苯氧基脂肪酸类)、安眠镇静药(包括苯并杂氮卓类、吩噻嗪类、巴比妥类以及佐匹克隆等其它常见催眠镇静药)、鼠药、苯丙胺类、吗啡类及其它毒品等毒物的检验方法学研究，在最优条件下得到它们的检出限，为阴性结果评价提供数据支撑，继而为相关的临床诊断、抢救及刑事侦查、诉讼提供有力的科学依据。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种血液中未知毒物的液相色谱-质谱筛查方法：取待检测血液样品1.0mL，加入2.0mL乙腈沉淀蛋白，振荡10min，离心(12000r/min，5min)，取上清液，0.22μm微孔有机滤膜过滤，然后进行LC-MS/MS分析，根据分析结果判断待检测血液样品中是否含有毒物成分；所用仪器选自AB公司ultraLC 100-XL-4000Q TRAP液质联用仪，或Agilent 1100液相色谱-AB3200 QTRAP三重串联四极杆质谱仪。

当采用AB公司ultraLC 100-XL-4000Q TRAP液质联用仪时，质谱条件为：a)离子源：电喷雾电离(ESI)；b)扫描方式：多反应监测模式(MRM)；c)气帘气(CUR)：20psi；d)碰撞气(CAD)：Medium；e)喷雾电压(IS)：5500(-4500)V；f)温度(TEM)：500℃；g)喷雾气(GS1)：50psi；h)辅助加热气(GS2)：50psi；i)接口加热(ihe)：on；j)碰撞室入口电压(EP)：10V；k)碰撞室出口电压(CXP)：6V；l)去簇电压(DP)，碰撞能量(CE)参数见附表A。