[发明专利]一种生物分子检测试剂、制备方法、检测设备及应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物分子检测领域，尤其涉及一种生物分子检测试剂、制备方法、检测设备及应用。

背景技术

目前，体液(血液、尿液、精液等)中与某些疾病相关的生物标志物(如循环肿瘤细胞、游离态的miRNA等)已被认为能够用于该疾病的早期检测。针对上述生物标志物的检测，分子信标检测技术具有背景信号低,灵敏度高、特异识别性强、操作简单，不必与未反应探针分离即可实时检测，可用于活体分析等优点，已逐渐被用于疾病的早期检测。

分子信标(Molecular Beacon)是一种短的寡核苷酸单链构成的茎环结构。通常，寡核苷酸链一端为荧光基团标记，另一端为淬灭基团标记。由于两端的核苷酸序列互补，其荧光基团和淬灭基团相互靠近发生能量共振转移，被激发后荧光基团产生的光子被淬灭基团淬灭。如果被检测的靶标分子能够与分子信标的单链环区域杂交，就能使茎环结构遭到破坏，荧光基团与淬灭基团之间的空间距离得以增大，就不能产生荧光能量共振转移，就能够检测被激发后荧光基团产生的荧光信号。

但是，通常使用的分子信标淬灭基团价格较为昂贵，并且其检测结果需要依赖荧光光谱仪等贵重的大型仪器进行表征，这在一定程度上限制了其应用。

发明内容

有鉴于此，本发明实施例提供了一种生物分子检测试剂、制备方法、检测设备及应用，主要目的是降低开发成本。

为达到上述目的，本发明主要提供了如下技术方案：

一方面，本发明实施例提供了一种生物分子检测试剂的制备方法，所述方法包括以下步骤：

将含碳酸钙的天然生物质加入磷酸盐溶液中，在温度为160℃-300℃，压力为10MPa-30MPa条件下，反应3-10天后得到反应产物；

根据待检测目标分子的核苷酸序列设计嵌合分子信标，使所述分子信标的环区域的核苷酸序列与所述待检测目标分子特异性识别，在所述分子信标的茎结构两个末端分别标记荧光发射基团和氨基后，再配制核酸分子信标溶液；

将所述分子信标溶液滴加至所述改性产物的表面，在温度为25℃-30℃的条件下避光孵育过夜，再用磷酸缓冲盐溶液冲洗所述反性产物，得到所述检测试剂。

作为优选，所述含碳酸钙的天然生物质为鸡蛋壳、海螺壳、贝壳或珊瑚。

作为优选，所述磷酸盐溶液的质量百分比为1.4％。

作为优选，所述反应产物合成时的反应温度为160℃-200℃，反应压力为10MPa-30MPa，反应时间为5-7天。

作为优选，所述分子信标的核苷酸序列是采用DNA合成仪合成；所述分子信标溶液的浓度为1μM-100μM。

另一方面，本发明实施例提供了一种生物分子检测试剂，所述检测试剂是由上述方法制备得到。

再一方面，本发明实施例提供了上述生物分子检测试剂在疾病早期检测中的应用。

又一方面，本发明实施例提供了一种生物分子检测设备，所述检测设备包括盒体、紫外光照射设备及滴管；

所述盒体依次设置样品室，用于滴加待检测液体；

滤膜，用于过滤所述待检测液体中杂质；

测试区，用于显示检测结果，所述测试区内设置有权利要求1-6任一项所述的检测试剂；

参考区，用于对照检测结果，所述参考区内设置有权利要求1-6任一项所述的检测试剂；

检测时，用滴管将所述待检测液体滴人所述样品室内，所述待检测液体经所述滤膜过滤后进入所述测试区，待所述测试区铺满所述待检测液体后，至少放置15分钟后，用所述紫外光照射设备照射所述测试区和所述参考区，比较两者显示出的荧光信号的差异，若无差异，则所述待检测液体中无目标分子存在，若有差异，则所述待检测体液中存在所述目标分子。

作为优选，所述盒体的材质为聚氯乙烯；所述滤膜的材质为以聚丙烯为支撑的玻璃纤维膜，所述滴管的材质为聚丙烯。

作为优选，所述紫外光照射设备为小型验钞仪。

本发明中，利用含碳酸钙的天然生物质与磷酸盐反应得到的改性产物为改性后的羟基磷灰石(HAp)。