[发明专利]一种银杏传粉滴的收集方法

说明书

本发明公开了一种银杏传粉滴收集的方法。具体包括以下步骤：（1）在银杏胚珠未产生传粉滴时采集其着生的枝条，所述胚珠大小为2‑3 mm，胚珠珠柄长度为1.5‑2 cm；（2）将胚珠着生的银杏枝条截成15‑25 cm及30‑45 cm的长度，枝条插入吸足水的花泥或三角瓶内，并放置在20‑25℃，湿度60%‑80%的室内进行培养，光照时间为10‑11 h。（3）将胚珠培养至产生传粉滴后，使用2.5μL移液枪对银杏传粉滴进行采集，收集时间为夜间11点左右，以及早晨7点左右。采用以上方法收集银杏传粉滴，每个胚珠可收集5次左右的传粉滴，收集的量大大增加，且收集到的传粉滴内有效物质较多，传粉滴不受花粉的污染。

技术领域

本发明涉及一种裸子植物传粉滴的采集方法，具体为一种银杏传粉滴的收集方法。

背景技术

裸子植物(Gymnosperms)是起源较古老的种子植物类群，由于裸子植物既保留了孢子植物的部分原始特征, 又具有种子植物的进化特性，因而在植物系统演化上处于重要的位置。裸子植物不具有真正的花，而是特殊结构的孢子叶球，且裸子植物大多为风媒传粉。因此，裸子植物为获得更高的有性生殖适应性，增加有效授粉，其大孢子叶球发育及胚珠形态结构已经演化形成各种独特的性状，如胚珠裸露、传粉滴分泌等。传粉滴是裸子植物胚珠在传粉期所产生的一种分泌物, 通过珠孔渗出, 并在珠孔处形成液滴状, 富含糖和氨基酸等营养物质。传粉滴可以增加胚珠接收花粉的面积，保持花粉活力，并负责将花粉从胚珠外部运输进胚珠内。此外，传粉滴还与花粉管萌发和受精等有性生殖过程关系密切，具有防御病菌侵染、识别花粉等方面的作用。因此,祼子植物散粉期或之前产生的传粉滴在其生殖过程中扮演着非常重要的角色。

银杏(Ginkgo biloba L.)，为银杏科银杏属的落叶乔木，是典型的风媒传粉植物，雌雄异株。银杏具有极高的药用、食用和观赏等价值。比如，银杏的种子中含有多种营养物质，包括蛋白质、脂肪、钙、磷、铁、胡萝卜素等，还含有内酯、胆固醇、聚戊醇等有效成分，对于心脑血管疾病具有良好的疗效。由于银杏传粉滴中含有多糖类物质、蛋白质、纤维素、碳水化合物等物质，如果糖、葡萄糖和蔗糖等，为花粉萌发提供了营养来源，并且银杏传粉滴作为生殖细胞的载体，所以其传粉滴在有性生殖过程中起着非常重要的作用。然而，对于银杏传粉滴的研究还未能深入，主要是由于单个胚珠所分泌的传粉滴体积小，收集难度大，且生长在室外环境的胚珠所产生的传粉滴易接触花粉，随后传粉滴收缩且不再分泌。

通常收集传粉滴的方法是将带有胚珠的枝条剪下后水培一段时间，用毛细管对传粉滴收集，或在室外直接使用毛细管收集传粉滴，收集后放入-20℃或-80℃冰箱进行保存。但由于室外直接收集，胚珠及传粉滴容易沾染花粉，且毛细管收集容易导致传粉滴残留在管内，导致收集到传粉滴的含量较少，无法满足深入研究的需求。因此，因此建立配套的银杏传粉滴收集技术非常重要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种可以大量收集传粉滴的银杏传粉滴的收集方法。

实现本发明的技术方案是：

一种银杏传粉滴的收集方法，具体包括以下步骤：

（1）在银杏胚珠未产生传粉滴时采集其着生的枝条，所述胚珠大小为2-3 mm，胚珠珠柄长度为1.5-2 cm；

（2）先对步骤（1）采集的银杏枝条按照长度分为两类，较短的枝条进一步截为15-25 cm，较长的枝条进一步截为30-45 cm的长度；

将截为15-25 cm的枝插入花泥中，花泥放置在托盘中，且托盘中加满水；

将截为30-45 cm的枝条，插入9 cm高的三角瓶内进行培养，且瓶内加水，水高度在8 cm左右；处于瓶内的枝条上无短枝，将枝条上去除的带有胚珠的短枝插入花泥中；

（3）将步骤（2）所述两类枝条放置在20-25℃，湿度60%-80%的室内进行培养，光照时间为10-11 h；