[发明专利]一种用于质谱流式细胞技术的新型Barcoding89Y试剂

说明书

技术领域

本发明涉及细胞生物学技术领域，具体涉及一种用于质谱流式细胞技术的新型Barcoding 89Y试剂。

背景技术

Barcoding技术是在传统荧光流式技术中的一个重要应用，其原理是利用多个标签对细胞进行标记，根据不同组合种类来区分标记物，使流式可以进行加大通量的筛选工作。Barcoding技术具有很多优点：降低抗体损耗，缩短样品收集时间，减少样品转移过程中的交叉污染，消除染色过程中样品间(管与管之间)差异，除去细胞二聚体和细胞碎片等等。

质谱流式诞生后，这一项技术得到了更大的发展。质谱流式细胞仪可以提供更多的通道用于Barcording标记，因此可以做到更高的通量。目前质谱流式技术中应用Barcoding试剂仅有以下几种：102Pd，104Pd，105Pd，106Pd，108Pd，110Pd。随着质谱流式技术的发展越来越迅速，国内外对应用于该技术的Barcoding试剂种类需求也越来越大，以扩展适用于质谱流式细胞仪的Barcoding通道。而国内对于Barcoding试剂的相关研发产品很少。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于质谱流式细胞技术的新型Barcoding 89Y试剂，以解决现有技术的不足。

本发明采用以下技术方案：

一种用于质谱流式细胞技术的新型Barcoding 89Y试剂，包括如下步骤制备得到：

步骤一、一管X8 polymer中加入39～195μL L buffer，吹打均匀使X8 polymer充分溶解，后加入1～5μL 100mM氯化钇(III)六水合物溶液，混匀后孵育；

步骤二、孵育结束后，将全部溶液转移至3kd超滤管，离心；弃上清，收集超滤管内液体于离心管中，取40～200μL L buffer清洗超滤管并将液体全部收集至离心管中，充分混匀后即得到所述Barcoding 89Y试剂。

进一步地，步骤一中100mM氯化钇(III)六水合物溶液用1N盐酸溶液配制。

进一步地，步骤一于37℃孵育30min。

进一步地，步骤二于室温下12000g离心25min。

进一步地，步骤二得到的Barcoding 89Y试剂于4℃保存。

本发明的有益效果：

本发明开发出新型适用于质谱流式细胞仪的Barcoding 89Y试剂，可以对细胞进行标记从而加大流式通量的筛选工作，扩展了适用于质谱流式细胞仪的barcoding通道。

附图说明

图1为实施例1效果实验结果图。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明做更进一步地解释。下列实施例仅用于说明本发明，但并不用来限定本发明的实施范围。

一种用于质谱流式细胞技术的新型Barcoding 89Y试剂，包括如下步骤制备得到：

步骤一、一管X8 polymer中加入39～195μL L buffer，吹打均匀使X8 polymer充分溶解，后加入1～5μL 100mM氯化钇(III)六水合物溶液，混匀后于37℃孵育30min；其中，100mM氯化钇(III)六水合物溶液用1N盐酸溶液配制；

步骤二、孵育结束后，将全部溶液转移至3kd超滤管，于室温下12000g离心25min；弃上清，收集超滤管内液体于离心管中，取40～200μL L buffer清洗超滤管并将液体全部收集至离心管中，充分混匀后即得到所述Barcoding 89Y试剂，所得Barcoding 89Y试剂于4℃保存。

实施例1

1、准备试剂：

a、盐酸(AR级，10011018，国药集团化学试剂有限公司)，

b、氯化钇(III)六水合物(204919，Sigma)，

c、X8 polymer、L buffer(X8 Multimetal Labeling Kit—40 Rxn，201300，Fluidigm)，

d、磷酸盐缓冲液(pH7.4，Gibco)，

e、104Pd试剂(S00114,Fluidigm)。

2、用双蒸水配制1N盐酸溶液。

3、用1N盐酸溶液配制100mM氯化钇(III)六水合物溶液，充分混匀。

4、取出一管X8polymer，加入97.5μL L buffer，吹打均匀使X8polymer充分溶解。