[发明专利]一种肝螺杆菌LAMP快速检测方法有效
申请号: | 201710691336.0 | 申请日: | 2017-08-14 |
公开(公告)号: | CN107365851B | 公开(公告)日: | 2020-05-15 |
发明(设计)人: | 冯洁;谢建芸;高诚 | 申请(专利权)人: | 上海实验动物研究中心 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 200000 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 螺杆 lamp 快速 检测 方法 | ||
1.一种肝螺杆菌LAMP的检测引物组,由两条外引物、两条内引物和一条环引物组成,所述引物核苷酸序列为:
F3正向外引物:5’-GCAGCTTTAACATTAACTTGTGTA-3’(SEQ ID NO.1);
B3反向外引物:5’-AATGCGAATGTCGCTCAA-3’(SEQ ID NO.2);
FIP正向内引物:
5’-GCCCAGCTTGATAAACTCCGTATAGTTGAAACAAGTTGAATCTGTG-3’(SEQ ID NO.3);
BIP反向内引物:
5’-TCTGCCATATCCATAACTACCATTGATCTCCATTTTGATGGTATCG-3’;(SEQ ID NO.4)
LB反向环引物:5’-CCTTTAAGGCTTGTAACCCCA-3’(SEQ ID NO.5)。
2.一种肝螺杆菌LAMP的检测体系,包括以下组分:引物组:两条外引物、两条内引物和一条环引物;2×反应缓冲液、DNA聚合酶、荧光染料、DNA模板与灭菌纯净水;
所述引物由如下核苷酸序列组成:
F3正向外引物:5’-GCAGCTTTAACATTAACTTGTGTA-3’(SEQ ID NO.1);
B3反向外引物:5’-AATGCGAATGTCGCTCAA-3’(SEQ ID NO.2);
FIP正向内引物:
5’-GCCCAGCTTGATAAACTCCGTATAGTTGAAACAAGTTGAATCTGTG-3’(SEQ ID NO.3);
BIP反向内引物:
5’-TCTGCCATATCCATAACTACCATTGATCTCCATTTTGATGGTATCG-3’;(SEQ ID NO.4);
LB反向环引物:5’-CCTTTAAGGCTTGTAACCCCA-3’(SEQ ID NO.5)。
3.根据权利要求2所述的肝螺杆菌LAMP的检测体系,其特征在于,所述LAMP检测体系包括:以25μLLAMP的反应体系计,5pM的外引物F3和B3各1μL;40pM的内引物FIP和BIP各1μL;20pM的反向环引物LB 1μL;2×反应缓冲液12.5μL;Bst DNA聚合酶1μL;荧光染料1μL;DNA模板2μL,不足部分用灭菌纯净水补足。
4.一种肝螺杆菌LAMP的快速检测试剂盒,其特征在于,包括如权利要求1所述的引物组或权利要求2~3中任意一项的检测体系。
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