[发明专利]一种孔雀石绿免疫亲和凝胶检测柱及其制备方法

权利要求书

1.一种孔雀石绿免疫亲和凝胶检测柱，其特征在于：所述检测柱包括一层检测层，所述检测层是首先孔雀石绿抗体胶与封闭胶按体积比3:1混合加入检测柱，然后加入ZnCdSe/ZnS量子点形成的。

2.根据权利要求1所述的一种孔雀石绿免疫亲和凝胶检测柱，其特征在于：

所述封闭胶的制备：使用溴化氰活化琼脂糖凝胶，之后加入HCl溶液，搅拌溶胀后转移到具砂板层析柱中，用1mM/L PH＝3.0的HCl溶液进行淋洗，再用偶联缓冲液冲洗柱子，调解柱子至中性，加入甘氨酸封闭液室温反应2h，再用偶联缓冲液和醋酸钠缓冲液反复冲洗，待清洗液抽空，将制备好的封闭胶用含有0.3ml/L抑菌素的PBS悬起，封闭胶与PBS体积比1:3，放置于4℃保存待用；

所述孔雀石绿抗体胶的制备：方法同封闭胶，差别仅在于加入封闭液之前，在溴化氰活化琼脂糖凝胶中加入孔雀石绿特异性抗体，室温偶联2h；

所述ZnCdSe/ZnS量子点的制备：将8uM以巯基乙酸作为稳定剂合成的ZnCdSe/ZnS量子点，用PH＝7.4的PBS溶液稀释40000倍，避光待用。

3.根据权利要求1所述的一种孔雀石绿免疫亲和凝胶检测柱，其特征在于：

所述检测层的制备方法：孔雀石绿抗体胶和封闭胶按3:1比例混合后装入检测柱，用注射器压出混合胶中PBS液体，加入50ul制备好的ZnCdSe/ZnS量子点溶液形成检测层。

4.一种孔雀石绿免疫亲和凝胶检测柱的组装，其特征在于：

制作步骤为：将聚乙烯垫片加入1mL的检测柱中，然后加入200μL雀石绿抗体胶和封闭胶的混合胶，二者混合比例为3:1，用注射器将PBS压出，加入第二层聚乙烯垫片，加入待测物后再用注射器活塞将待测物中的PBS压出，然后加入50ul制备好的ZnCdSe/ZnS量子点溶液，并将量子点恰好全部压入孔雀石绿抗体胶和封闭胶的混合胶中。

5.权利要求1或2所述孔雀石绿免疫亲和凝胶检测柱，其特征在于：所述的孔雀石绿免疫亲和凝胶检测柱的检测限为10μg/L。