[发明专利]一种荧光微量RNA的检测装置及检测方法

权利要求书

1.一种荧光微量RNA的检测装置，其特征是：

激发光源A位于样品槽左侧，激发光源B位于样品槽右侧，分别焊接在电路板上，嵌于光传输通道内，用于激发样品中的荧光物质；激发光探测单元A位于激发光源A与样品槽之间，激发光探测单元B位于激发光源B与样品槽之间，激发光探测单元B与样品槽高度均低于激发光源B，激发光探测单元B与样品槽焊接在电路板上，嵌于光传输通道内，保证激发光能照射到样品槽内样品；

荧光探测单元A、荧光探测单元B分别垂直位于样品槽与激发光光路的两侧，焊接在电路板上，嵌于光传输通道内；

光传输通道为封闭式光传输通道，底部通过膨胀螺栓固定于电路板上；

滤光片A、滤光片B分别位于激发光源A、激发光源B与样品槽之间，嵌于光传输通道内；

信号检测单元焊接在电路板上，用于将荧光探测单元A、荧光探测单元B转换的电信号，进行前置放大、解调、滤波、采集；

主控单元焊接在电路板上；

激发光控制单元焊接在电路板上；

液晶显示单元镶嵌于壳体上表面，通过通讯线缆与电路板连接。

2.如权利要求1所述的一种荧光微量RNA的检测装置，其特征是：

荧光探测单元A、荧光探测单元B分别垂直位于样品槽与激发光光路的两侧，焊接于电路板上，嵌于光传输通道内；测量范围为300-1,000nm；发射通道为绿光510–580nm、红光665–720nm；选择蓝光激发时，读取绿色或远红外通道的荧光；当激发光为红光时，只读取远红外通道的荧光。

3.一种荧光微量RNA的检测方法，其方法是：

采用PikoGreen dsDNA定量试剂盒(Broad Range)，

PikoGreen dsDNA定量试剂盒组分是

A为1×定量缓冲液 250mL，

B为100×反应液 5mL，

C为100×反应增强液 5mL，

D为dsDNA标准品 9×0.5mL；

步骤一：使用之前，将产品由存储条件下取出恢复至室温，每个组分充分震荡或涡旋混匀、离心，以避免不必要的试剂损耗；

步骤二：配制双链DNA定量试剂；工作液，按照1:199的配比，分别吸取2×TE缓冲溶液与无菌去离子水(定量缓冲液A)，混匀；新配工作液应该在1小时之内使用；

步骤三：制作标准品，取两个EP管，每支管按照1:19的配比加入不同浓度的dsDNA标样与工作液，混匀，总体积为200μL，得到标准品1与标准品2；

步骤四：制作标准曲线，将两个标准品依次放入荧光计样品槽内，室温孵育两分钟，使用激发波长为350nm，发射波长为460条件测量荧光值，可确定出标准曲线；

步骤五：检测样品的DNA浓度，按照1:199与1：9之间的配比，取待测样品与稀释缓冲液混匀，总体积为200μL；放入荧光计样品槽内，室温孵育两分钟，读取与样本荧光强度相对应的DNA浓度；

所有试剂处于室温之下，样品混匀放入样品槽内需要室温孵育两分钟；

得到的标定值可储存，方便以后使用；检测数据可存储，最多可存储1,000个样品结果，并且可通过U盘导出；此外，在样品的延伸范围或超过试剂盒的检测范围，仪器屏幕上均会有图形显示。