[发明专利]低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其使用方法有效
申请号: | 201710682384.3 | 申请日: | 2017-08-10 |
公开(公告)号: | CN107505272B | 公开(公告)日: | 2020-09-25 |
发明(设计)人: | 孙文勇;常俊骏;郑佳 | 申请(专利权)人: | 东软威特曼生物科技(南京)有限公司 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31 |
代理公司: | 北京中企鸿阳知识产权代理事务所(普通合伙) 11487 | 代理人: | 郭鸿雁 |
地址: | 210039 江苏省南*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 密度 脂蛋白 胆固醇 检测 试剂盒 及其 使用方法 | ||
本发明低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒及其使用方法涉及生化检测领域。其目的是为了提供一种稳定性高、毒性低、准确度和精密度高的低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒其使用方法。本发明的试剂盒包括试剂1:表面活性剂;聚乙二醇;十二烷基磺酸钠;Emulgen A9系列;胆固醇氧化酶;胆固醇酯酶;抗坏血酸氧化酶;过氧化氢酶;4‑氨基安替比林等;试剂2:聚乙二醇辛基苯基醚;胆酸盐;复合稳定剂;牛血清白蛋白;过氧化物酶;3‑乙基‑N‑(3‑磺丙基)‑3‑甲基苯胺钠盐等。本发明的试剂盒中加入的proclin系列是一种新型的生物防腐剂,与多种酶具有良好的相容性,具有较好的稳定性和低毒性,维持试剂的稳定性。
技术领域
本发明涉及生化检测领域,特别是涉及一种借助于测定材料的化学物理性质来测定材料的试剂盒。
背景技术
除了和白蛋白结合的游离脂肪酸外,存在于血液的脂质掺入脂蛋白的结构中,并且它们以乳糜微粒(CHM)、极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)等等的形式存在。胆固醇特别地分布于VLDL、LDL和HDL。已知LDL起运输胆固醇的作用,并且高水平的LDL促进动脉硬化。已知血液中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的测量成为动脉硬化发生和进行的指示物。
Burstein M等人(Rapid Method for the Isolation of Lipoproteins fromHuman Serum by Precipitation with Polyanions,J.Lipid Research11:583,1970)描述,主要地通过使用聚阴离子化合物使除了HDL外的脂蛋白特异凝集。然而,该文献描述的聚阴离子化合物特异地和非LDL(VLDL或者HDL)形成复合物是困难的。
CC Heuck和G Schlierf(Beta-lipoprotein cholesterol quantitation withpolycations,Clin Chem 1977 23:536-540)描述通过使用聚乙烯亚胺和阳离子交换树脂排除VLDL和HDL,从而定量脂蛋白胆固醇。然而,该文献描述的方法难以解决其要求孵育15分钟或更长,以及其需要两类试剂的问题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种稳定性高、特异性强、准确度和精密度高的低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒其使用方法。
本发明涉及一种低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒,所述试剂盒包括试剂1和试剂2;
所述试剂1包括:
其余为GOOD’S缓冲液MOPS(3-(N-吗啡啉)丙磺酸)(MOPS为缓冲液的主要成分),所述缓冲液pH值为7.0;
所述试剂2包括:
其余为GOOD’S缓冲液MOPS,所述缓冲液pH值为7.0。
环糊精是一类表面活性剂和相转移催化剂,能选择性地进行某些有机反应。
优选地,所述复合稳定剂包括吐温80 10~13g/L,谷氨酸20~30g/L,谷胱甘肽1~3g/L,海藻糖50~60g/L,十二烷基二甲基甜菜碱2~6g/L,卵磷脂3~6g/L,缓冲液100~120mmol/L;其为申请号为201610166107.2的多种抗体的复合稳定剂及其使用方法中的复合稳定剂。
优选地,所述试剂1包括:
其余为GOOD’S缓冲液MOPS,所述缓冲液pH值为7.0;
所述试剂2包括:
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