[发明专利]一种载脂蛋白E检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种载脂蛋白E检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R1中包含乙基苯基聚乙二醇1-51g/L，所述试剂R2中包含乙基苯基聚乙二醇1-51g/L、镁盐0.01-16.5g/L、醋酸钙0.01-20g/L和抗体10-1000mg/L。

2.根据权利要求1所述的载脂蛋白E检测试剂盒，其特征在于：所述试剂R1中乙基苯基聚乙二醇为5-40g/L，优选为30g/L；所述试剂R2中乙基苯基聚乙二醇为4-41g/L，优选为32g/L。

3.根据权利要求1或2所述的载脂蛋白E检测试剂盒，其特征在于：所述镁盐为0.05-10g/L，优选为5g/L；所述镁盐优选为硫酸镁、氯化镁或醋酸镁中的一种或多种。

4.根据权利要求1-3任一项所述的载脂蛋白E检测试剂盒，其特征在于：所述醋酸钙为0.03-16.5g/L，优选为9g/L。

5.根据权利要求1-4任一项所述的载脂蛋白E检测试剂盒，其特征在于：所述试剂R1中还包含缓冲液、无机盐、防腐剂和聚集物；优选地，所述试剂R1中还包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L和聚集物1-60g/L。

6.根据权利要求1-5任一项所述的载脂蛋白E检测试剂盒，其特征在于：所述试剂R2中还包含缓冲液、无机盐和防腐剂，优选地，所述试剂R2中还包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L和防腐剂0.5-1g/L。

7.根据权利要求1-6任一项所述的载脂蛋白E检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包含校准品，所述校准品采用多点定标，所述校准品包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.1-2g/L、葡聚糖0.3-100g/L、海藻糖1-100g/L、蔗糖1-100g/L、牛血清白蛋白1-100g/L和抗原。

8.一种载脂蛋白E检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R1中包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、聚乙二醇6000 1-60g/L、乙基苯基聚乙二醇1-51g/L；所述试剂R2中包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、抗体10-1000mg/L、乙基苯基聚乙二醇1-51g/L、硫酸镁0.01-16.5g/L、醋酸钙0.01-20g/L；

优选地，

所述试剂R1中包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、聚乙二醇6000 1-60g/L、乙基苯基聚乙二醇5-40g/L；所述试剂R2中包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、抗体10-1000mg/L、乙基苯基聚乙二醇4-41g/L、硫酸镁0.05-10g/L、醋酸钙0.03-16.5g/L；

更优选地，

所述试剂R1中包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、聚乙二醇6000 1-60g/L、乙基苯基聚乙二醇30g/L；所述试剂R2中包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、抗体10-1000mg/L、乙基苯基聚乙二醇32g/L、硫酸镁5g/L、醋酸钙9g/L。

9.根据权利要求1-8任一项所述的载脂蛋白E检测试剂盒，其特征在于：

所述抗体优选为羊抗人、兔抗人、马抗人、鼠抗人或其他动物抗人抗体；

所述缓冲液优选为醋酸盐缓冲液、氯化铵缓冲液、磷酸盐缓冲液、TRIS缓冲液、硼酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、CAPSO、MOPS或Hepes缓冲液中的一种或几种；所述无机盐优选为氯化钠、氯化钾中的一种或两种；

所述防腐剂优选为叠氮钠、苯酚、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯或乙基汞硫代硫酸钠中的一种或几种；

所述聚集物优选为聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000或聚乙二醇8000中的一种或几种。

10.一种利用上述载脂蛋白E检测试剂盒的检测方法，包括如下步骤：

(1)向待测样品中加入试剂R1混匀，待测样品与试剂R1按体积比为(1-9)：300加入，37℃孵育，在一定的波长下，读取吸光度A1；

(2)向步骤(1)的混合液中加入试剂R2混匀，试剂R2与试剂R1按体积比为1：(1-6)加入，37℃孵育，在一定的波长下，读取吸光度A2；

(3)得出吸光度△A，△A＝A2-A1；

(4)使用校准品在全自动生化分析仪上通过内置曲线拟合模式拟合标准曲线，根据吸光度自动计算出待测样品中载脂蛋白E的含量。