[发明专利]一种伏马毒素B1基体标准物质及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及农产品安全检测技术领域，具体地说为涉及一种伏马毒素B₁基体标准物质及其制备方法。

背景技术

伏马毒素主要是由串珠镰刀菌(Fusariummoniliforme)在一定温度和湿度条件下产生的水溶性次级代谢产物，迄今为止已发生了十一种伏马毒素，其中最为重要的是伏马毒素B₁(FB₁)。研究表明，摄入FB₁能引起马大脑白质软化症(Equine Leucoencephalomalacia，ELEM)，猪肺水肿综合征(Porcine Pulmonary Edema，PPE)，对老鼠的毒性研究表明，FB₁容易对肝脏或肾脏造成损伤。此外，FB₁还具有很强的细胞毒性及免疫毒性，与人类食道癌的发生密切相关。因此，国际癌症研究中心(International Agency for Research on Cancer,IARC)把FB₁列为2B级致癌物作为人类潜在的致癌物质。在我国，FB₁更是一类分布广泛，危害巨大的真菌毒素，约占伏马毒素污染总量的70％。

目前用于检测FB₁的方法主要包括：酶联免疫法、液相色谱串联质谱法、衍生化后液相色谱连接紫外检测法等。但是，不同实验室甚至同一实验室采用不同的检测方法，同一样品的分析结果之间存在明显的差异，量值很难做到统一，难以确保不同实验室检测结果的可比性。

基体标准物质是具有高度均匀性、良好稳定性以及量值准确性的一种计量标准，有利于克服由于基体效应所引起的误差，从而保证检测结果的准确且量值的溯源性，同时可以用于校准仪器，验证检测方法及实验室的质量控制。此外，由于FB₁的标准品溶液与被FB₁污染的小麦及玉米样品存在较大的差异，其进入人和动物体内的生理活性、生物转化路径及毒性强弱均不一致，从而导致其代谢、毒理研究结果的不可靠。而基体标准物质在性质上、基体组成上与实际样品一致，因此，采用基体标准物质替代纯真菌毒素标准品溶液进行此方面的研究更具有应用价值及指导意义。目前，尚未有FB₁基体标准物质及其制备方法的报道。

发明内容

本发明的目的首先在于提供一种FB₁基体标准物质的制备方法，该方法包括如下步骤：

将FB₁的产毒真菌菌株接种到食用农产品(如玉米、小麦、大米)的培养基中，培养产毒，利用冷冻干燥机将高产毒培养基冻干，粉碎过筛；

按照等比稀释原则，加入空白食用农产品粉(如玉米、小麦、大米)使FB₁至量值水平，再混合均匀得FB₁的食用农产品(玉米/小麦/大米)基体标准物质；

该方法可以提供FB₁的食用农产品(如玉米、小麦、大米)基体标准物质；

其中产毒菌株为FB₁的高产毒真菌菌株，如串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)；菌株的产毒环境：温度为10-30℃，湿度为0.92-0.98a_w，培养基为玉米、小麦或者大米，暗黑培养，培养时间为7-35天；

其中菌株产毒后的培养基必须通过冷冻干燥机冻干后粉碎过筛(60目-500目)，冻干时间为0.5-7天；

过筛后的高产毒培养基，加入空白食用农产品粉后，必须通过混合塑料器混合均匀；其中所采用的混合器为三维混合器，混合桶必须采用不粘附混合物的塑料桶或相当的容器，不可为钢桶或铁桶等；

其中所述的混合时间随制备的基体标准物质的量值改变而变化，当制备0-100g基体标准物质时，所需的混合时间为0.1-4h，当制备100-300g基体标准物质(不含100g)时，所需的混合时间为0.5-8h，当制备300-500g基体标准物质(不含300g)时，所需的混合时间为0.5-16h，当制备500-2000g基体标准物质(不含500g)时，所需的混合时间为0.5-24h；

其中所采用的空白食用农产品粉应该为不含FB₁的干燥粉末，即低于检测方法检出限1μg/kg；

本发明还提供了经过上述制备方法制备得到的FB₁基体标准物质，该基体标准物质经均匀性检验后，进行分装；