[发明专利]一种沉积物中肌醇磷酸盐与腐殖酸相互作用的分析方法

权利要求书

1.一种水环境中肌醇磷酸盐与腐殖酸相互作用的分析方法，其特征在于，所述分析方法包括如下步骤：

S1.取沉积物样品，获取沉积物样品提取液；

S2.沉积物样品提取液³¹P-NMR分析，分析得到沉积物样品提取液中肌醇磷酸盐总量为y1；

S3.沉积物样品提取液的酶水解分析，分析获得沉积物样品提取液中酶水解肌醇磷酸盐的含量y2；

S4.取含量为y2的肌醇磷酸盐溶液，分别采用³¹P-NMR分析和酶水解分析肌醇磷酸盐的含量，采用³¹P-NMR分析得到肌醇磷酸盐的含量为x1，采用酶水解分析得到肌醇磷酸盐的含量为x2；

S5.沉积物中肌醇磷酸盐与腐殖酸相互作用含量的计算

沉积物样品提取液中肌醇磷酸盐与腐殖酸相互作用含量X=（y1-y2）-(x1-x2)。

2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述酶水解分析的步骤包括：取沉积物样品提取液或肌醇磷酸盐溶液样品两份，第一份加入植酸酶、磷酸二酯酶和碱性磷酸酶混合液，第二份加入磷酸二酯酶和碱性磷酸酶混合酶液，

样品经培养后，检测沉积物样品提取液或肌醇磷酸盐溶液样品中释放正磷酸盐含量，分析二者的差值，获得沉积物样品提取液或肌醇磷酸盐溶液样品中酶水解肌醇磷酸盐的含量。

3.根据权利要求2所述的分析方法，其特征在于，所述植酸酶为提纯后的植酸酶。

4.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述沉积物样品提取液的提取过程包括：取沉积物样品，加入酸溶液震荡提取2-4h；再加入碱溶液，室温振荡处理15-20h，离心分离，得沉积物样品提取液。

5.根据权利要求4所述的分析方法，其特征在于，所述酸溶液为盐酸溶液；所述碱溶液为NaOH溶液和KOH溶液中的一种或两种的混合。

6.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述³¹P-NMR分析的过程包括：沉积物样品提取液的前处理过程：取所述沉积物样品提取液冷冻干燥，浓缩成粉末样品；加入NaOH-EDTA 重水溶液，手动摇晃并使用超声振荡使粉末样品充分溶解；

分析处理过程：经静置、离心分离得上清液，上清液经³¹P-NMR分析，采用分析处理软件定量分析沉积物样品中肌醇磷酸盐含量。

7.根据权利要求6所述的分析方法，其特征在于，所述重水溶液中含有过量的Na₂S。

8.根据权利要求1-7任一项所述的分析方法，其特征在于，所述³¹P-NMR分析，室温温度为20-25^oC，核磁共振的频率为500MHz以上，配备适合进行³¹P-NMR谱图分析的探头，扫描次数为12000~15000次。

9.根据权利要求1-7任一项所述的分析方法，其特征在于，所述³¹P-NMR分析还包括加标沉积物样品提取液的分析，所述加标沉积物样品提取液的分析具体为：向沉积物样品提取液中，加入适量肌醇六磷酸盐标准样品以及包括亚甲基二磷酸盐、葡萄糖6磷酸盐、葡萄糖1磷酸盐、α-甘油磷酸盐、β-甘油磷酸盐、单磷酸腺苷、胆碱磷酸和二酯磷DNA-P的有机磷标准样品，再次分析加标后样品提取液³¹P-NMR谱图。

10.根据权利要求1-7任一项所述的分析方法，其特征在于，所述分析方法还包括对沉积物样品提取液中总磷、Fe、Ca、Al、Mg和Mn金属元素含量的分析。