[发明专利]HPLC-ELSD同时测定鲜冬虫夏草中4种甾醇含量的方法及应用有效
| 申请号： | 201710665000.7 | 申请日： | 2017-08-07 |
| 公开（公告）号： | CN107576736B | 公开（公告）日： | 2019-12-10 |
| 发明（设计）人： | 李文佳;孙敏甜;李文庆;钱正明;邱健健 | 申请（专利权）人： | 广东东阳光药业有限公司;宜昌山城水都冬虫夏草有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 523808 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 冬虫夏草 甾醇 检测 中药材 真伪 鉴别 对照品溶液制备 供试品溶液制备 定量分析 样品处理 质量标准 甾醇类 虫草 耗时 应用 分析 | ||
1.一种同时测定冬虫夏草中4种甾醇含量的HPLC-ELSD方法，其特征在于：所述4种甾醇物质分别为麦角甾醇、胆甾醇、豆甾醇和谷甾醇；
所述方法包括以下步骤：
(1)供试品溶液制备：取冬虫夏草样品，加入氢氧化钾-乙醇溶液进行回流提取；随后离心，得上清液；之后过滤，得到供试样品溶液；
(2)对照品溶液制备：取对照品麦角甾醇、胆甾醇、豆甾醇和谷甾醇，置于容量瓶中混合均匀，加入氢氧化钾-乙醇充分溶解并定容至刻度线，制成混合对照品溶液；
(3)HPLC-ELSD检测：检测条件：色谱柱为C18，其规格为：4.6×250mm,5μm；流动相A为水，流动相B为甲酸-甲醇溶液；梯度洗脱：0-10min，3％-0％A；10-30min，0％A；30-35min，0％-3％A；将所述步骤(1)和步骤(2)所得的供试样品溶液和对照品溶液分别注入HPLC-ELSD联用仪，进行检测。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中供试品溶液的制备方法为：
精密称取冬虫夏草样品，按照重量体积比加入1:5～20g/mL的0.5mol/L氢氧化钾-乙醇溶液进行回流提取，提取时间为15～40min；随后离心，得上清液；之后经滤膜过滤，得到供试样品溶液。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相B为0.005％-0.2％甲酸-甲醇溶液。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相B为0.005％甲酸-甲醇溶液。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中对照品溶液的制备方法为：
精密称取对照品麦角甾醇、胆甾醇、豆甾醇和谷甾醇各20mg，置于100mL容量瓶中混合均匀，加入0.5mol/L氢氧化钾-乙醇充分溶解并定容至刻度线，制成混合对照品溶液。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)HPLC-ELSD检测的检测条件为：色谱柱为Waters Xbridge C18，其规格为：4.6×250mm，5μm；流动相A为水，流动相B为甲酸-甲醇溶液；柱温30℃，流速1.0mL/min，梯度洗脱：0-10min，3％-0％A；10-30min，0％A；30-35min，0％-3％A；Gain：6；漂移管温度：35℃。
7.如权利要求1所述的方法在鉴别冬虫夏草真伪品中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于广东东阳光药业有限公司;宜昌山城水都冬虫夏草有限公司，未经广东东阳光药业有限公司;宜昌山城水都冬虫夏草有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201710665000.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
