[发明专利]一种高效液相色谱固定相制备方法及色谱柱

权利要求书

1.一种高效液相色谱固定相制备方法，其特征在于，所述高效液相色谱固定相制备方法包括以下步骤：

步骤一，功能基团4-(2-苯基色原酮)甲基丙烯酸酯的合成；

步骤二，巯基丙基三甲氧基硅烷修饰硅胶的制备；

步骤三，基于巯基烯烃点击化学方法制备固定相；

步骤四，以甲醇为匀浆剂制备固定相匀浆，以甲醇为顶替液，于40MPa的压力下填装至150mm*内径4.6mm的色谱柱中，填装好的色谱柱以纯甲醇以0.3ml/min的流速冲洗30倍柱体积。

2.如权利要求1所述的高效液相色谱固定相制备方法，其特征在于，所述步骤一具体包括：

(1)4-羟基苯甲醛12.46g，碳酸钾和催化剂量的KI分散于100mL新蒸丙酮中，在氮气保护下滴加1.2当量的烯丙基溴，升温至回流反应过夜，反应结束后旋转蒸干丙酮，残余物质以乙酸乙酯溶解；

(2)转移至分液漏斗中，并以饱和食盐水洗涤，有机相以无水硫酸镁干燥，旋转蒸干有机溶剂，快速柱层析得到4-烯丙氧基苯甲醛，将所得的产品在40％KOH水溶液作为催化剂和等当量的邻羟基苯乙酮反应，反应结束后倾倒至适量的冰水中并以2M盐酸调节pH至2，观察到大量黄色固体析出，抽滤；

(3)关环反应是在以4％当量的碘作为催化剂，DMSO为溶剂于140℃下进行；脱保护过程用到了四(三苯基膦)钯作为催化剂，得到4'-羟基黄酮；

(4)利用4'-羟基黄酮和甲基丙烯酰氯制备4-(2-苯基色原酮)甲基丙烯酸酯。

3.如权利要求1所述的高效液相色谱固定相制备方法，其特征在于，所述步骤二具体包括：

1)5g干燥的高效液相色谱级硅胶分散于50mL重蒸的甲苯中，逐滴滴加4mL巯基丙基三甲氧基硅烷，再于氮气保护下升温至回流反应48小时；

2)反应结束后，待分散液冷却至室温后，以5000rpm的转速离心处理，分别以甲苯、无水乙醇洗涤三遍，40℃真空干燥过夜，待用。

4.如权利要求1所述的高效液相色谱固定相制备方法，其特征在于，所述步骤三具体包括：

第一步，4.0g 4-(2-苯基色原酮)甲基丙烯酸酯溶解于100mL四氢呋喃中，再加入8.0g巯基丙基三甲氧基硅烷修饰的硅胶，超声分散2min；

第二步，加入200mg偶氮二异丁腈，氮气脱气20分钟，密闭于65℃反应48小时，反应结束后以5000rpm离心处理，分别以四氢呋喃、无水乙醇洗涤三遍，干燥待用。

5.一种利用权利要求1～4任意一项所述高效液相色谱固定相制备方法制备的色谱柱。