[发明专利]一种原位生成硫化银竞争型黄曲霉毒素光电化学传感器的制备方法及应用

说明书

本发明属于免疫分析和生物传感技术领域，提供了一种原位生成硫化银竞争型黄曲霉毒素光电化学传感器的制备方法及应用。采用WO₃为基底，其优良的导电性和大的表面积能有效减小背景信号。利用银离子功能化八面体钒酸铋纳米颗粒标记黄曲霉毒素，通过滴加硫化钠原位生成高光电转换率的窄带隙Ag₂S作为信号放大材料，通过可见光波长的LED灯照射下产生光电流信号。载体八面体钒酸铋与硫化银带隙匹配度良好，能进一步提高硫化银的光电转换效率，实现了常见黄曲霉毒素的检测，具有特异性强，灵敏度高，检测限低，对黄曲霉毒素的检测具有重要的科学意义和应用价值。

技术领域

本发明属于新型功能纳米材料、免疫分析和生物传感技术领域，提供了一种原位生成硫化银竞争型黄曲霉毒素光电化学传感器的制备方法及应用。

背景技术

近年来，食品污染日趋严重和频繁，不仅造成巨额的经济损失，还会严重影响人类的健康。黄曲霉毒素是由多种生长在粮食(小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等)、花生、蔬菜等农作物上的曲霉和青霉产生的。由于分布广泛，很容易通过污染的谷物或饲料等进入食物链，进而污染奶、蛋、肉等动物源食品，间接的进入人体内，最终造成肝肾损伤、繁殖障碍、免疫抑制、致癌致畸等严重后果。

食品检测是保证食品安全的重要环节，本发明提供了一种快速、简便、灵敏度和选择性高的光电化学免疫分析方法。光电化学传感器是基于物质的光电转换来确定待测物浓度的一类检测装置，光电化学检测方法具有灵敏度高、设备简单、易于微型化的特点，已经成为一种极具应用潜力的分析方法，在食品、环境、医药等领域具有广阔的应用前景。

本发明专利成功构建了在可见光激发下检测黄曲霉毒素的光电化学免疫传感器。该传感器以WO₃为基底，其优良的导电性和大的表面积能有效减小背景信号。利用银离子功能化八面体钒酸铋纳米颗粒标记黄曲霉毒素，通过滴加硫化钠原位生成高光电转换率的窄带隙硫化银作为信号放大材料。本发明制备的基于原位生成硫化银竞争型光电化学传感器，具有低成本、高灵敏、特异性好、检测快速、制备过程简单等优点，在可见光区域实现了对黄曲霉毒素的快速、灵敏检测，有效克服了目前黄曲霉毒素检测方法的不足。

发明内容

本发明提供了一种原位生成硫化银竞争型黄曲霉毒素光电化学传感器的制备方法及应用，实现了对黄曲霉毒素的超灵敏检测。

本发明的目的之一是提供一种原位生成硫化银竞争型黄曲霉毒素光电化学传感器的制备方法。

本发明的目的之二是将所制备的原位生成硫化银竞争型黄曲霉毒素光电化学传感器，用于检测黄曲霉毒素。

本发明的技术方案，包括以下步骤。

一种原位生成硫化银竞争型黄曲霉毒素光电化学传感器的制备方法，包括以下几个步骤：

（1）将ITO导电玻璃切割至2.5cm × 1.0cm大小，依次用丙酮、乙醇和超纯水清洗30min，氮气吹干；

（2）取10 µL、3 ~ 5 mg/mL的WO₃滴加到导电玻璃的导电面，室温下晾干，300℃煅烧120 min，冷却到室温，在WO₃修饰电极表面滴加3~ 5 µL、0.1mol/L的巯基乙酸，室温下晾干，滴加3 ~ 5μL的EDC/NHS混合液，4 ℃冰箱中干燥，超纯水冲洗；

（3）将4~ 6 µL、10 µg/mL的黄曲霉毒素抗原滴加到电极表面，4 ℃冰箱中干燥，超纯水冲洗；

（4）继续将2 ~ 4 µL、质量分数为1%的BSA溶液滴加到电极表面，以封闭电极表面上非特异性活性位点，4 ℃冰箱中晾干，超纯水冲洗电极表面；