[发明专利]一种酶解法提取铁皮石斛多糖的工艺

说明书

本发明公开了一种高效、安全、适宜工业化生产的酶解法提取铁皮石斛多糖的工艺。主要包括以下步骤：取铁皮石斛，粉碎过20‑80目筛，加入4‑6倍量含有果胶酶：纤维素酶：漆酶(1‑2:1‑3:0.5‑2.5)的重量比例混合制成复合酶系的冰乙酸缓冲溶液(加冰乙酸溶液调节pH值至4.0‑6.0)，控制酶解温度25‑50℃，酶解1‑5h。转移至适宜容器中，加饮用水4‑8倍，回流提取2h，滤过(120目筛)，滤液浓缩至相对密度1.25‑1.40(60℃)；加入乙醇使药液含醇量达70‑80％，搅拌均匀，静置12h后，离心，收集沉淀物，挥去乙醇；60‑80℃真空干燥，即得。分别测定多糖含量和甘露糖含量并计算提取率，结果铁皮石斛多糖提取率为39.88％‑46.16％，甘露糖提取率为48.26％‑55.63％。

技术领域

本发明涉及中草药的提取加工技术，具体是关于一种铁皮石斛多糖的酶解法提取工艺。

背景技术

铁皮石斛为兰科植物铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo的干燥茎。具有滋阴养胃、润肺止咳和清热明目之功效，是传统的珍稀名贵中药材之一，名列“九大仙草”之首，因具有抗肿瘤、抗衰老、抗声带疲劳、扩张血管和增强人体免疫力等作用，被称为救命仙草。由于石斛自然繁殖力低，种子需与真菌共生才能萌发，加上长期采挖，使得野生铁皮石斛资源日渐枯竭，成为濒危植物，被列为国家重点保护的野生药材品种，因此铁皮石斛资源的有效利用日益受到科研工作者的关注。

铁皮石斛具有益胃生津、滋阴清热等功效，用于热病津伤，口干烦渴，胃阴不足，食少干呕，病后虚热不退，阴虚火旺，骨蒸劳热，目暗不明，筋骨痿软以及恶性肿瘤的辅助治疗以及慢性咽炎、慢性胃炎、糖尿病和久病体虚免疫功能低下等。经现代药理学研究证明，铁皮石斛中含有的主要活性成分为石斛多糖、石斛碱、氨基酸、芪类及其衍生物、微量元素以及多种挥发性成分等。石解多糖主要由葡萄糖、半乳糖、木糖、甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等单糖组成，是其具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、增强免疫功能、降低血糖，抗肝损伤等活性的主要成分。多糖含量的高低是判断铁皮石解质量优劣的重要标准(《中国药典》2015年版一部第282页石斛项下规定)。

传统水提法是提取铁皮石解多糖的主要方法，近年有超声或微波辅助水提法、酶解法、超高压提取法、闪式提法等用于铁皮石斛多糖的提取。叶余原[文献1：超声法提取铁皮石斛多糖工艺的研究[J].中药材,2009,32(04): 617-620.]采用超声法提取铁皮石斛多糖工艺的研究结果以料液比1∶30的，50℃超声水浴，45kHz超声频率，提取1.5h，铁皮石斛多糖的平均提取得率为15.3％。尚喜雨等[文献2：正交实验优选铁皮石斛多糖提取工艺的研究[J].辽宁中医杂志,2010,37(04):708-709.]采用微波辅助提取铁皮石斛多糖，在微波功率400W，pH值为8，微波作用时间6min，料液比1:50的条件下多糖提取量为17.48％。纵伟等[文献3：石斛多糖超高压提取工艺条件的优化[J].郑州轻工业学院学报(自然科学版),2012,27(04):36-39.]采用超高压方法提取铁皮石斛中的多糖成分，将石斛粉碎到80目后，按固液比1∶20，采用300MPa的压力提取6min后，石斛多糖的得率达到19.27％。王培培等[文献4：正交实验法优化铁皮石斛多糖的提取工艺[J].时珍国医国药,2012,23(11):2781-2782.]料液比1∶40，浸提温度70℃，浸提时间2h，浸提2次，铁皮石斛多糖的得率达到31.9％。唐政等[文献5：混合酶提法提取铁皮石斛中石斛多糖的优化工艺研究[J].北方园艺,2014,(06):132-134.]采用纤维素酶与果胶酶的等量混合提取铁皮石斛多糖。结果在工艺条件pH6.5、1％浓度的纤维素酶和果胶酶1∶1等量混合、50℃下提取135min，石斛多糖提取率为41.33％。吴迪等[文献6：铁皮石斛多糖提取工艺优化研究[J].浙江科技学院学报,2016,28(06):444-449.]实验结果表明，料液质量比1∶120、浸提温度70℃、浸提90min时提取铁皮石斛多糖提取率为55.2％。

因此，本领域内技术人员致力于研究一种提高铁皮石斛多糖提取率的提取工艺，从而提高铁皮石斛资源的有效利用。