[发明专利]一种Gal‑1使IEC产生免疫耐受信号的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于医疗药物技术领域，尤其涉及一种Gal-1使IEC产生免疫耐受信号的测定方法。

背景技术

免疫耐受是指机体免疫系统接受某种抗原作用后产生的特异性的免疫无应答状态。对特异性抗原产生免疫耐受的个体，再次接触该抗原刺激后，不发生免疫应答或不能发生用常规方法可检测到免疫应答。因此正常的免疫耐受机制对维持机体健康至关重要。目前对免疫耐受产生的机制还不十分明了。虽然近年来国际上和国内对损害免疫耐受的因素研究进展很快，但对于使已经形成的免疫耐受损伤的恢复及其导致的疾病的康复还远不能令人满意。动物实验和临床研究表明，免疫耐受失常和多种疾病的发病有关，例如过敏性疾病(如哮喘、食物过敏)，自身免疫性疾病(如糖尿病、系统性红斑狼疮)以及某些非特异性炎症病(如炎症性肠病)等。这些疾病的发病人数众多，每年治疗这些疾病的医疗费用耗资巨大。因此，由于免疫耐受失常而引起的疾病对人类的健康和社会经济有重大的负面影响。

综上所述，现在的技术存在的问题是：目前免疫耐受失常疾病的治疗是特异性免疫治疗(SIT)，系世界卫生组织确定的对免疫耐受失常而引起的疾病治疗的唯一的特异性治疗方法。但SIT的疗效很不满意，疗程太长(长达3年)，疗效急需进一步改善；并且，SIT缺乏促使失常的免疫耐受机能的恢复方法的理论指导。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了Gal-1使IEC产生免疫耐受信号的测定方法。

本发明是这样实现的，一种Gal-1使IEC产生免疫耐受信号的测定方法，口服Gal-1能使IEC产生大量的整合素avb6；avb6是一种蛋白酶，能切割TGFb(转化生长因子β)前体上的短肽使之获得活性；TGFb是机体免疫耐受机制的关键分子；除了能发挥免疫调节功能之外，还能诱导免疫调节细胞；因此当IEC同时吸收Gal-1和特异性抗原时，肠粘膜内的免疫系统即可产生抗原特异性免疫调节细胞，抑制过敏反应。

所述Gal-1使IEC产生免疫耐受信号的测定方法包括以下步骤：

步骤一，Gal-1采用梯度浓度配制；

步骤二，在IEC中培养；

步骤三，将共刺激分子测定结果和Gal-1浓度进行相关分析；

步骤四，IEC细胞株的使用；

步骤五，微生物产物，建立过敏反应动物模型中用作佐剂的微生物产物；

步骤六，细胞培养时间可根据实验结果调整。

进一步，所述Gal-1的浓度为0～5μM。

进一步，所述IEC培养密度为10⁶细胞/ml。

进一步，所述IEC细胞株：包括IEC-6，T84，HT-29和Caco-2。

进一步，所用抗原为卵白蛋白(OVA)，是一种模式抗原；作为抗原的代表。

进一步，所述过敏反应动物模型从5周，致敏小鼠坐或/和Gal-1处理；治疗1周后，用特异性抗原OVA致小鼠免疫，第二天处死小鼠，观察肠道过敏反应。

本发明的优点及积极效果为：通过同时使用Gal-1和OVA，诱导OVA-特异性免疫调节细胞；从而逆转肠道粘膜的过敏状态；使之恢复为免疫常态；肠道的过敏状态被抑制；恢复正常。口服Gal-1能使IEC产生大量的整合素avb6；avb6是一种蛋白酶，能切割TGFb(转化生长因子β)前体上的短肽使之获得活性；TGFb是机体免疫耐受机制的关键分子；除了能发挥免疫调节功能之外，还能诱导免疫调节细胞；因此当IEC同时吸收Gal-1和特异性抗原时，肠粘膜内的免疫系统即可产生抗原特异性免疫调节细胞，抑制过敏反应。

附图说明

图1是本发明实施提供的Gal-1使IEC产生免疫耐受信号的测定方法流程图。

图2是本发明实施提供的过敏反应动物模型结果示意图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。

如图1所示，本发明实施例提供的Gal-1使IEC产生免疫耐受信号的测定方法包括以下步骤：

S101：Gal-1和LPS采用梯度浓度配制；

S102：在IEC中培养；

S103：将共刺激分子测定结果和Gal-1浓度进行相关分析；

S104：IEC细胞株的使用；