[发明专利]一种基于SPR的多种毒品检测芯片的制备方法在审
申请号: | 201710649618.4 | 申请日: | 2017-08-02 |
公开(公告)号: | CN107478613A | 公开(公告)日: | 2017-12-15 |
发明(设计)人: | 王鹏娟;孟凡伟;余杰 | 申请(专利权)人: | 杭州晶百检测技术有限公司 |
主分类号: | G01N21/552 | 分类号: | G01N21/552 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙)11465 | 代理人: | 王鹏 |
地址: | 310000 浙江省杭州市西湖*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 spr 多种 毒品 检测 芯片 制备 方法 | ||
1.一种基于SPR的多种毒品检测芯片的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)准备载体材料;
2)在载体材料上镀一层金膜,金膜厚度范围在40~45nm,并将镀有金膜的载体材料浸泡在巯基烷酸中制得羧基芯片;
3)将羧基芯片的表面与EDC/NHS混合液充分接触,活化羧基芯片表面的羧基基团制得活化羧基芯片;
4)将活化羧基芯片与多种毒品合成抗原溶液充分接触,使多种毒品合成抗原偶联到羧基芯片上;
5)将乙醇胺溶液与完成多种毒品合成抗原偶联的羧基芯片充分反应,封闭未反应的羧基位点,制得多种毒品检测芯片。
2.根据权利要求1所述的一种基于SPR的多种毒品检测芯片的制备方法,其特征在于,步骤2)中浸泡金膜的条件为:在温度范围40~45℃的条件下孵育的时间保持30~35min,或者在常温条件下孵育的时间保持12h以上。
3.根据权利要求1所述的一种基于SPR的多种毒品检测芯片的制备方法,其特征在于,步骤2)还包括在镀金膜后对载体材料上的金膜进行超声清洗处理以及冲洗干燥处理;超声条件为:清洗介质选用乙醇溶液,温度条件为室温,超声强度为55-60%、超声时间保持5min以上;冲洗干燥处理条件为:选用去离子水冲洗,冲洗之后用氮气吹干。
4.根据权利要求1至3任一项所述的一种基于SPR的多种毒品检测芯片的制备方法,其特征在于,在步骤2)与步骤3)之间还包括:在羧基芯片表面覆盖PDMS,PDMS开设通道,通道有多条,通道两端分别为进样口和出样口,并且通道在经过步骤3)、步骤4)和步骤5)处理之后制成检测通道。
5.根据权利要求1所述的一种基于SPR的多种毒品检测芯片的制备方法,其特征在于,步骤3)中EDC/NHS混合液为浓度400mM的EDC溶液和浓度100mM的NHS溶液按照等体积混合所得的溶液。
6.根据权利要求1所述的一种基于SPR的多种毒品检测芯片的制备方法,其特征在于,步骤3)对羧基芯片进行活化的EDC/NHS混合液的体积在200μL以上。
7.根据权利要求6所述的一种基于SPR的多种毒品检测芯片的制备方法,其特征在于,对采用EDC/NHS混合液活化后的羧基芯片通入PBS进行冲洗,冲洗流速为20μL/min。
8.根据权利要求1所述的一种基于SPR的多种毒品检测芯片的制备方法,其特征在于,步骤4)中多种毒品合成抗原溶液的体积在100μL以上。
9.根据权利要求1所述的一种基于SPR的多种毒品检测芯片的制备方法,其特征在于,在步骤4)和步骤5)之间还包括:对偶联的羧基芯片通入PBS进行冲洗,冲洗流速为20μL/min。
10.根据权利要求1-3、5-9任一项所述的一种基于SPR的多种毒品检测芯片的制备方法,其特征在于,步骤5)中封闭合成抗原偶联的羧基芯片的未反应羧基位点的具体操作为通入浓度为1M、体积为200μL、PH=8.5的乙醇胺溶液,完成之后再通入PBS进行冲洗。
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