[发明专利]一种高效防治柑橘溃疡病的生防菌株CH01及其应用

说明书

本发明公开了一种高效防治柑橘溃疡病的生防菌株CH01及其应用。生防菌株CH01为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)，其菌株保藏号为CGMCC NO.11677。平板抑制实验结果显示，蜡状芽孢杆菌CH01不仅能显著抑制柑橘溃疡病菌地毯草黄单胞菌柑橘致病变种的生长，同时对多种病原真菌具有显著的抑制效果。除此之外，蜡状芽孢杆菌CH01在体外表现出较强的水解酶活性。温室试验结果表明，蜡状芽孢杆菌CH01能够有效预防柑橘溃疡病的发生与发展，田间试验结果显示蜡状芽孢杆菌CH01对柑橘溃疡病的防治效果高达65.46％，因此生防菌株CH01能作为一种生防制剂，高效防治柑橘溃疡病。

技术领域

本发明属于农作物病害生物防治技术领域,涉及一种高效防治柑橘溃疡病的生防菌株CH01及其应用。

背景技术

芸香科柑橘属水果，如柑橘、橙子及柠檬，作为人们喜爱的水果，随着高效农业的推进，我国柑橘产业生产迅速发展，种植面积快速扩大。随着柑橘种植的专业化，多年的栽培使果园中柑橘溃疡病病原菌基数逐年增多，进而导致柑橘溃疡病发生日趋严重，一般损失率达15％～20％；严重时达30％～50％；最高可达100％，造成树梢溃疡病变，叶片大量发病，果实果皮畸形，溃疡，严重影响果实外观及口感，失去食用价值。同时也能引起田间损失，甚至在果实的储存和运输中造成严重危害。目前针对柑橘溃疡病菌的防治还没有效果好的防治措施和方法。现阶段在柑橘生产过程中对溃疡病的主要防治措施仍然是喷洒化学药剂等手段，但是由于长期的使用化学药使得溃疡病菌对多种杀菌剂产生了抗药性。我国西南地区等柑橘重点种植区中的柑橘树上的溃疡病菌都产生了较为严重的抗药性。寻求新的防治措施成为溃疡病菌防治的重中之重。生物防治措施作为一种新兴的防治措施，与其他方法相比，具有安全、有效、持久的特点，特别是避免了化学防治带来的一系列问题。生防制剂对病害防治效果好，对人畜无毒，不污染环境，无残留；对病虫害的杀伤特异性强，不伤害天敌，有益生物，能保持生态平衡；生产原料和有效成分为天然产物易降解，可回归大自然，保证可持续发展因此。因此生物防治溃疡病逐渐成为研究的热点，大量的拮抗微生物被筛选出来对柑橘溃疡病进行防治。

发明内容

本发明的目的针对柑橘溃疡病防治困难，柑橘生长促生效果差的现状，提供开发一种高效防治柑橘溃疡病的微生物菌剂CH01，专用于防治柑橘溃疡病。

本发明的目的可通过以下技术方案实现：

高效防治柑橘溃疡病的生防菌株CH01，生防菌株CH01经测序鉴定，为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。于2015年11月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.11677。

生防菌株CH01菌体细胞杆状，末端方形，1.1～1.2×3.2～5.1μm。革兰氏阳性，无荚膜。菌落大，表面粗糙，扁平，不规则。产芽孢，芽孢圆形或柱形，中生或近中生，1.2～1.6μm。

本发明所述的防治柑橘溃疡病的生防菌株CH01在防治柑橘属植物溃疡病方面的应用。

所述的柑橘属植物优选包括柑橘、橙子、柠檬、香橼中的任意一种。

由本发明防治柑橘溃疡病的生防菌株CH01制备的生防菌剂。

高效防治高效防治柑橘溃疡病的生防菌株CH01的制备方法为：

将防治柑橘溃疡病的生防菌株CH01在LB(LB配方：氯化钠10g/L，胰蛋白胨10g/L，酵母浸粉5g/L，调节pH值为7.2)平板上划线，28℃培养24h，待长出单菌落后，挑取单菌落分别接入三支含有5mL的LB液体培养基的管中，置于28℃，200r/min的摇床中培养24h，制成种子液。以1％的接种量将种子液接种于装有500mL的LB液体培养基的三角瓶里，置于28℃，200r/min的摇床中培养48h，制成微生物合剂，其活菌总浓度为5×10⁹～1×10¹⁰CFU/mL。