[发明专利]一种蛋白合成冻干制剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于体外蛋白合成的无细胞冻干制剂，其特征在于，所述冻干制剂包括：

(a) 细胞提取物，所述的细胞提取物为酵母细胞的提取物；和

(b) 蛋白合成促进剂，其中所述的蛋白合成促进剂选自下组：单糖、二糖、寡糖、可溶性淀粉、或其组合。

2.如权利要求1所述的无细胞冻干制剂，其特征在于，所述蛋白合成促进剂选自下组：蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、或其组合。

3.如权利要求1所述的无细胞冻干制剂，其特征在于，所述的无细胞冻干制剂进行重构后，形成无细胞的酵母体外蛋白质合成体系。

4.如权利要求1所述的无细胞冻干制剂，其特征在于，当所述的无细胞冻干制剂重构为液态制剂后，所述的蛋白合成促进剂的浓度为0.2-5wt%，以所述液态制剂的总重计。

5.如权利要求1所述的无细胞冻干制剂，其特征在于，所述酵母细胞选自下组的一种或多种来源的酵母：酿酒酵母、毕氏酵母、克鲁维酵母、或其组合；较佳地，所述的酵母细胞包括：克鲁维酵母，更佳地为乳酸克鲁维酵母。

6.一种制备权利要求1所述的无细胞冻干制剂的方法，其特征在于，包括：

(i) 提供一细胞提取物，所述的细胞提取物为酵母细胞的提取物；

(ii) 向所述的细胞提取物中添加蛋白合成促进剂,获得一混合物，所述蛋白合成促进剂选自下组：单糖、二糖、寡糖、可溶性淀粉、或其组合；和

(iii) 将所述的混合物进行冻干，获得经冻干的权利要求1所述的无细胞冻干制剂。

7.一种物质的用途，其特征在于，所述的物质选自下组：单糖、二糖、寡糖、可溶性淀粉、或其组合，并且所述物质用于制备提高蛋白合成活性的试剂。

8.一种试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括容器以及位于所述容器中的权利要求1所述的无细胞冻干制剂。

9.一种表达待表达的外源蛋白的方法，其特征在于，包括：

(i) 提供一酵母体外蛋白质合成体系，其中所述的合成体系中含有蛋白合成促进剂，所述蛋白合成促进剂选自下组；单糖、二糖、寡糖、可溶性淀粉、或其组合；和

(ii) 在适合表达蛋白的条件下，在所述外源蛋白的模板存在下，孵育所述酵母体外蛋白质合成体系，从而表达所述的外源蛋白。

10.一种体外蛋白合成体系，其特征在于，包括：

(a) 细胞提取物，所述的细胞提取物为酵母细胞的提取物；和

(b) 蛋白合成促进剂，其中所述的蛋白合成促进剂选自下组：单糖、二糖、寡糖、可溶性淀粉、或其组合。