[发明专利]一种用于肠外营养相关性肝病药物的制备方法

说明书

本发明公开了一种用于肠外营养相关性肝病药物的制备方法，将慢病毒包装质粒、包膜表达质粒与干扰表达载体质粒组合成三质粒慢病毒表达系统，然后共转染至包装细胞，经培养后裂解得到肠外营养相关性肝病药物；本发明设计特异性干扰IRE1α基因的shRNA包装成慢病毒，从而高效导入BRL细胞，可实现IRE1α基因稳定的干扰效果，实现肠外营养相关性肝病的缓解、治疗。

技术领域

本发明属于药物技术领域，具体涉及一种用于肠外营养相关性肝病药物的制备方法。

背景技术

肠外营养(parenteral nutrition, PN)给不能通过正常肠道方式来满足生长的新生儿带来了革命性关爱。但长时间(＞2周)持续应用PN也存在许多相关问题，肠外营养相关性肝病(total parenteral nutrition-associated liver disease, PNALD) 是其中一种最常见的并发症。随着长时间PN的应用，PNALD发生率增加，PNALD具有不同程度的脂肪肝、黄疸，严重者可进展为肝硬化，最终发生肝功能衰竭危及生命。PN应用2周后可看到PNAC组织学证据，6周后可观察到不同程度的纤维化。然而，临床上因肝脏病理检查具有创伤性，不为人们接受，PNALD诊断多依赖生化结果：直接胆红素≥2mg/dL而无引起肝功能紊乱的其他原因。

多年来国内外学者对PNALD的病因、发病机制研究很多，但确切病因及发病机制仍尚不明确。人们对PN营养液中脂肪乳成分关注较多，最近研究表明，静脉营养液中的脂肪乳剂会导致肝脏脂肪变性、脂肪性肝炎、肝细胞损伤和胆汁淤积等，严重时可引起肝硬化导致肝衰竭。目前针对新生儿PNALD临床上主要治疗措施包括限制肠外营养液中的豆油脂肪乳、鱼油脂肪乳取代豆油脂肪乳和使用豆油脂肪乳和鱼油脂肪乳混合来源的脂肪乳剂等。

虽PNALD已被认识30年以上，但至今仍只有少数被认可的治疗方案。现就近年来临床上有效防治PNALD的一些方法综述如下：

一、预防方案：

1、减少肠外营养的使用时间，尽早开始经口喂养。

尽早开始肠内营养，可恢复粘膜的完整性，最大限度地促进胆汁引流。无法经口喂养的短肠综合征患者，可以尝试缩短PN的持续时间。如果可耐受间断的肠外营养，则可以减少肝脏毒性，而且间断的肠外营养支持更优于持续静脉营养，不仅可以提高肝细胞养分的氧化，同时也可以保护肝细胞免受肠道内毒素的侵袭。然而，在最近的一项研究并不支持此结论，该研究发现极低出生体重儿早期预防性间断应用PN，并没有降低胆汁淤积的发生率。

2、避免高热量碳水化合物、蛋白质和脂类的过度摄入。

ASPEN 指南推荐减少大豆乳化剂量为1g/kg/d。但降低肝酶的同时，也需要体重增加的减轻和缺少脂质引起脑发育的限制的负面影响。最近研究表明：长期限减少脂肪乳剂治疗的婴儿，在2–5岁时的评分在正常范围内。

3、熊去氧胆酸（ursodeoxycholic acid UDCA）

UDCA已被证明可以通过提高亲水性胆汁酸等机制改善和预防肝损伤，同时可减少胆囊胆管增厚及扩张。同时还有直接保护细胞的作用和调节免疫的功能。熊去氧胆酸也可通过抑制外周血单个核细胞中细胞因子的释放，如IL-2，IL-4和IFN-γ等，从而抑制细胞免疫反应。目前已有可靠证据表明接长期肠外营养的婴儿口服UDCA对于阻止胆汁淤积是有效的。最近的一项实验发现口服UDCA的实验组比对照组发生胆汁淤积更晚，但并无证据表明UDCA对于新生儿胆汁淤积症有积极的作用。总之，目前UDCA对于PNALD的预防作用不可确定。

4、导管相关性败血症的预防