[发明专利]一种老虎家系鉴定的试剂、方法和应用

说明书

本申请公开了一种老虎家系鉴定的试剂、方法和应用。本申请的老虎家系鉴定的试剂，包括22对特异性引物，22对特异性引物上下游引物依序为Seq ID No.1至Seq ID No.44所示序列，其中，Seq ID No.1和Seq ID No.2为一对特异性引物，Seq ID No.3和Seq ID No.4为一对特异性引物，如此两条引物组合为一对特异性引物，以此类推。本申请的老虎家系鉴定试剂，能对老虎家系进行准确、高效、快捷鉴定，对老虎基因育种和优生优育进行指导。采用本申请的试剂，对老虎进行家谱和老虎群体DNA档案建立，从基因水平指导老虎的育种和繁殖，提高老虎群体遗传多态性，提高了老虎的生育率和生存率。

技术领域

本申请涉及老虎家系鉴定领域，特别是涉及一种老虎家系鉴定的试剂、方法和应用。

背景技术

老虎作为濒危物种，已有不少品种灭种绝迹，目前已列入《世界自然保护联盟》(缩写IUCN)2012年濒危物种红色名录version 3.1、《中国国家重点保护野生动物名录》Ⅰ级以及《华盛顿公约》CITESⅠ级保护动物。据统计我国现存老虎仅5000多只，以人工圈养为主。在人工圈养的过程中，容易引起老虎近亲繁殖，进而导致生育率下降、存活率较低等一系列问题。

基因育种能够实现优生优育，防止近亲交配，保护种群的遗传多样性。但是，目前国内外尚没有老虎家系鉴定的方法或试剂盒，无法对老虎进行有效的基因育种。因此，开发一种准确、高效、快捷、经济的老虎家系鉴定方法已经刻不容缓；这对老虎基因育种具有极大的指导意义。在建立老虎基因家谱的同时，建立老虎群体的DNA档案，从基因水平指导老虎的育种和繁殖，提高老虎群体的遗传多态性，对提高老虎的生育率和生存率具有重大的科学意义和应用价值。

发明内容

本申请的目的是提供一种新的老虎家系鉴定的试剂，基于该试剂的老虎家系鉴定方法，以及该试剂的应用。

本申请采用了以下技术方案：

本申请的一方面公开了一种老虎家系鉴定的试剂，该试剂包括22对特异性引物，22对特异性引物的上下游引物依序为Seq ID No.1至Seq ID No.44所示序列，其中，Seq IDNo.1和Seq ID No.2为一对特异性引物，Seq ID No.3和Seq ID No.4为一对特异性引物，Seq ID No.5和Seq ID No.6为一对特异性引物，如此两条引物组合为一对特异性引物，以此类推。

需要说明的是，本申请的22对特异性引物实际上是针对22个靶标设计的，这22个靶标包括21个短串联重复序列(缩写STR)和1个性别鉴定靶标，通过对这22个靶标进行检测，就可以快速的进行老虎家系的鉴定，从而有效的预防老虎的近亲交配，实现老虎的基因育种和优生优育，保护老虎群体的遗传多态性，进而提高老虎的生育率和生存率。本申请的22个靶标具体为：DA2S1059、DE1S613、DA2S1575、DA1S1145、DB1S542、DA1S1290、DB2S734、DD3S86、DB3S187、DB4S1505、DA3S461、DE3S497、DE3S579、DA1S1470、DA3S1123、DC1S1364、AMEL、DD3S899、DD2S793、DB1S1096、DB1S1259和DD4S705。其中，AMEL为老虎性别鉴定靶标，其余21个为短串联重复序列。本申请的22对特异性引物具体如表1所示。

优选的，22对特异性引物被分为五个引物混合组，具体的，第一引物混合组由第1-5对特异性引物组成，第二引物混合组由第6-10对特异性引物组成，第三引物混合组由第11-14，第四引物混合组由第15-18，第五引物混合组由第19-22对特异性引物组成。