[发明专利]促进罗汉果UGT72B21基因表达的方法

权利要求书

1.一种促进罗汉果UGT72B21基因表达的方法，其特征在于，包括如下步骤：在罗汉果组培过程中和罗汉果栽培过程中，施加浓度50-400 μmol/L的茉莉酸甲酯，以促进罗汉果UGT72B21基因的表达；

所述罗汉果组培过程中，将所述茉莉酸甲酯添加到所述罗汉果组培过程中的固体培养基中，所述罗汉果组培过程中所述固体培养基由MS、1.5mg/L 6-BA、0.3mg/L IBA、3.5g/L琼脂、30g/l蔗糖和1.0g/L活性炭组成，所述罗汉果组培过程中的培养条件为：于相对湿度60-66%，光照强度1400lux，光照时间8h/d和温度21~25℃条件下培养30d；

所述罗汉果栽培过程中，于罗汉果授粉后20~30天后，向罗汉果表面喷洒所述浓度50-400μmol/L的茉莉酸甲酯至其表面滴水为止，每天于早上、中午和晚上各喷洒一次，连续喷施5天，所述罗汉果栽培过程中，向罗汉果表面喷洒的茉莉酸甲酯的温度为4~10℃，同时，还采用注射的方式将茉莉酸甲酯注射入罗汉果植株的主茎中，注射量为5~16ml，注射的速率为4~8ml/h；

还包括如下步骤：qRT-PCR检测UGT72B21基因的表达：

1）采集罗汉果果实，切成2-4mm小块并分别用锡箔纸包好，立即置于液氮中速冻，保存于-80℃备用；

2）采用Trizol法提取罗汉果果实总RNA；

3）将RNA反转录为cDNA；

4）采用ABI7500实时荧光定量PCR仪检测UGT72B21基因的表达量，其中，扩增UGT72B21的引物序列为：上游引物CGCCATATGCACCACCACCACCACCACATGGAAGCTACGCAGAGAGACG，下游引物CCCTCGAGTTAAGACTCAAGAAATGCAAACTTA，内参基因用UBQ5基因，扩增引物序列为：上游引物ATAAAAGACCCAGCACCACATTC，下游引物CCCTTGCCGACTACAACATCC。

2.如权利要求1所述的促进罗汉果UGT72B21基因表达的方法，其特征在于，还包括：茉莉酸母液配制：用2%（v/v）的乙醇水溶液溶解茉莉酸甲酯，配制成10000μmol/L的母液，并用0.22μm的微孔滤膜灭菌，得到灭菌后的茉莉酸甲酯母液；

将该茉莉酸甲酯母液添加到罗汉果组培过程中的固体培养基中，至茉莉酸甲酯的终浓度为50-400 μmol/L；

用乙醇助溶，将茉莉酸甲酯母液配成50-400 μmol/L的溶液，施加于所述罗汉果栽培过程中。