[发明专利]促进罗汉果UGT74AC1基因表达的方法在审
| 申请号: | 201710629292.9 | 申请日: | 2017-07-28 |
| 公开(公告)号: | CN107360970A | 公开(公告)日: | 2017-11-21 |
| 发明(设计)人: | 李华政;韦荣昌 | 申请(专利权)人: | 李华政 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01G7/06 |
| 代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙)11369 | 代理人: | 靳浩 |
| 地址: | 530002 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 促进 罗汉果 ugt74ac1 基因 表达 方法 | ||
1.一种促进罗汉果UGT74AC1基因表达的方法,其特征在于,包括:
步骤一、罗汉果组培苗接种在含有茉莉酸甲酯的固体培养基中培养,其中,茉莉酸甲酯在固体培养基中的浓度为50-400μmol/L;培养期间,每隔3天将罗汉果组培苗从所述固体培养基中取出,将罗汉果组培苗的根部浸泡于温度为5℃的清水中,浸泡15分钟,之后再将罗汉果组培苗的根部浸泡于温度为室温的清水中,浸泡5分钟,之后再将罗汉果组培苗重新接种回所述固体培养基中;
步骤二、栽培所述步骤一培养得到的罗汉果植株,在栽培期间,将浓度为50-400μmol/L的茉莉酸甲酯喷洒于授粉后20-30d的罗汉果表面,至表面滴水为止,早、中、晚各喷洒一次,连续喷施5d。
2.如权利要求1所述的促进罗汉果UGT74AC1基因表达的方法,其特征在于,所述步骤一中,所述培养条件为:相对湿度60-66%、光照强度1400lux,光照时间8h/d,温度21-25℃条件下培养30d。
3.如权利要求2所述的促进罗汉果UGT74AC1基因表达的方法,其特征在于,所述的固体培养基配比为MS+6-BA 1.5mg/L,IBA 0.3mg/L,琼脂3.5g/L,蔗糖30g/l,活性炭1.0g/L。
4.如权利要求3所述的促进罗汉果UGT74AC1基因表达的方法,其特征在于,所述步骤一中,所述含有茉莉酸甲酯的固体培养基通过以下方式制备得到:用体积百分比浓度为2%的乙醇水溶液溶解茉莉酸甲酯,配制成10000μmol/L的茉莉酸甲酯母液,并用0.22μm的微孔滤膜灭菌,将灭菌后的茉莉酸甲酯母液添加到固体培养基中,至茉莉酸甲酯的最终浓度为50-400μmol/L,将固体培养基灭菌并冷却至24-26℃。
5.如权利要求1所述的促进罗汉果UGT74AC1基因表达的方法,其特征在于,还包括:
步骤三、利用qRT-PCR检测所述步骤二栽培得到的罗汉果果实中的UGT74AC1基因表达。
6.如权利要求5所述的促进罗汉果UGT74AC1基因表达的方法,其特征在于,所述步骤三中,采用改良Trizol法提取罗汉果果实总RNA。
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