[发明专利]一种核酸适配体修饰金纳米星的制备方法及应用

权利要求书

1.一种核酸适配体修饰金纳米星的制备方法，其特征在于，包括：依次将dATP溶液和十二烷基硫酸钠溶液加入到金纳米星溶液中震荡孵育，随后分多次间隔加入氯化钠溶液，再加入巯基修饰的核酸适配体孵育修饰，最后离心获得核酸适配体修饰金纳米星沉淀。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还包括核酸适配体修饰金纳米星的后处理，具体包括：用pH值为7.2～7.4的PBS溶液重复洗涤核酸适配体修饰金纳米星沉淀2-4次，去除未修饰成功的核酸适配体，最后将沉淀溶于含磷酸钠、牛血清白蛋白、吐温和蔗糖的复溶液中保存。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述dATP溶液的浓度为80-120nmol/L，所述dATP溶液的孵育时间为16-24min；优选地，dATP溶液的浓度为100nmol/L，孵育时间为20min。

4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述十二烷基硫酸钠溶液的浓度为0.8-1.2wt％，所述十二烷基硫酸钠溶液的孵育时间为8-12min；优选地，十二烷基硫酸钠溶液的浓度为1wt％，孵育时间为10min。

5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述氯化钠溶液的浓度为0.8-1.2mol/L，加入次数为4-7次，间隔时间为15-25min；优选地，氯化钠溶液的浓度为1mol/L，加入次数为5次，间隔时间为20min。

6.根据权利要求1-5任一项所述的制备方法，其特征在于，所述核酸适配体孵育修饰的孵育温度为55-65℃，孵育时间为2.5-3.5h；优选地，孵育温度为60℃，孵育时间为3h。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述复溶液为20nmol/L的磷酸钠、5％牛血清白蛋白、0.25％的吐温-20和10％的蔗糖的混合溶液。

8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法，其特征在于，还包括金纳米星溶液的制备，具体包括：按体积比为(40-60)：1的比例量取pH值为7.4-7.8、浓度为40mmol/L的4-羟乙基哌嗪乙磺酸溶液和0.01％w/v的氯金酸溶液，混合，室温下静置孵育40min，即得。

9.权利要求1-8任一项所述的制备方法在农药残留检测中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，组装基于“竞争法”的层析试纸条，分别将待检样品、核酸适配体修饰金纳米星及其核酸适配体互补序列固定在所述层析试纸条上，通过检测核酸适配体修饰金纳米星的结合对象，判断得到待检样品中的农药残留结果。