[发明专利]一种高效扩增全T细胞的人工抗原递呈细胞及其用途

权利要求书

1.一种转基因人工抗原递呈细胞，其特征在于，所述转基因人工抗原递呈细胞：

（1）表达T细胞第一信号膜结合型激活性抗体、T细胞第二信号膜结合型激活性抗体和细胞因子；和/或

（2）基因组中稳定整合了含编码T细胞第一信号膜结合型激活性抗体、T细胞第二信号膜结合型激活性抗体和细胞因子的表达框；

其中，所述T细胞第一信号膜结合型激活性抗体是抗CD3抗体；所述T细胞第二信号膜结合型激活性抗体是抗CD28抗体和抗CD137抗体；所述细胞因子是IL-15胞外结构域与IL15的α受体的融合蛋白。

2.如权利要求1所述的转基因人工抗原递呈细胞，其特征在于，所述表达框的两端均包含转座子的反向末端重复序列。

3.如权利要求2所述的转基因人工抗原递呈细胞，其特征在于，

所述转座子选自：piggybac、sleeping beauty、frog prince、Tn5和Ty；

所述转基因人工抗原递呈细胞选自树突状细胞、单核细胞和活化的B细胞。

4.如权利要求3所述的转基因人工抗原递呈细胞，其特征在于，所述转座子为piggybac。

5.如权利要求3所述的转基因人工抗原递呈细胞，其特征在于，所述转基因人工抗原递呈细胞为不表达人类MHC分子的细胞。

6.如权利要求3所述的转基因人工抗原递呈细胞，其特征在于，所述转基因人工抗原递呈细胞为K562细胞。

7.如权利要求1所述的转基因人工抗原递呈细胞，其特征在于，所述抗CD3抗体为抗CD3单链抗体。

8.如权利要求1所述的转基因人工抗原递呈细胞，其特征在于，

所述抗CD3抗体是抗CD3ε肽链的单链抗体；和/或

所述抗CD28抗体为抗CD28单链抗体，所述抗CD137抗体为抗CD137单链抗体。

9.如权利要求8所述的转基因人工抗原递呈细胞，其特征在于，

所述抗CD3抗体的氨基酸序列为SEQ ID NO:1第61-780位碱基序列所编码的氨基酸序列；

所述抗CD28单链抗体的氨基酸序列为SEQ ID NO:2第58-783位碱基序列所编码的氨基酸序列；

所述抗CD137单链抗体的氨基酸序列为SEQ ID NO:3第61-795位碱基序列所编码的氨基酸序列；和

所述IL-15的胞外结构域与其α受体的融合蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:4第58-669位碱基序列所编码的氨基酸序列。

10.如权利要求1所述的转基因人工抗原递呈细胞，其特征在于，所述细胞转入了以下表达载体：

（1）含有依次连接的转座子5’反向末端重复序列、控制所述T细胞第一信号膜结合型激活性抗体的编码序列表达的启动子、所述T细胞第一信号膜结合型激活性抗体的编码序列、CD28胞外区和跨膜区的编码序列、polyA加尾信号序列、转座子3’反向末端重复序列、转座酶编码序列以及控制该转座酶编码序列表达的启动子的核酸构建体；

（2）含有依次连接的转座子5’反向末端重复序列、控制所述T细胞第二信号膜结合型激活性抗体的编码序列表达的启动子、所述T细胞第二信号膜结合型激活性抗体的编码序列、CD8胞外区和跨膜区的编码序列、polyA加尾信号序列、转座子3’反向末端重复序列、转座酶编码序列以及控制该转座酶编码序列表达的启动子的核酸构建体；和

（3）含有依次连接的转座子5’反向末端重复序列、控制所述细胞因子的编码序列表达的启动子、所述细胞因子的编码序列、CD8胞外区和跨膜区的编码序列、polyA加尾信号序列、转座子3’反向末端重复序列、转座酶编码序列以及控制该转座酶编码序列表达的启动子的核酸构建体。