[发明专利]一种从菊苣中提取山莴苣类苦味素的方法

说明书

本发明公开了一种从菊苣中提取山莴苣类苦味素的方法，包括如下步骤：将菊苣根粉碎后，用水进行浸提，过滤后减压浓缩得总浸膏；将总浸膏分散于水中，利用乙酸乙酯萃取，经减压蒸馏后得到乙酸乙酯浸膏；将步骤二中获得的乙酸乙酯浸膏溶解后梯度洗脱分离，梯度洗脱中流动相A为乙酸乙酯，流动相B为甲酸，流动相C为正丁醇，洗脱条件为：0‑4min，45％A、50％B、5％C；4‑10min，45‑40％A、50‑55％B、5％C；10‑14min，40‑30％A、55％B、5‑15％C；14‑20min，30％A、55％B、15％C。本发明中提供的提取方法简便可行，且分离获得的山莴苣素和山莴苣苦素的纯度均大于98.0。

技术领域

本发明涉及一种分离方法，尤其涉及一种从菊苣中提取山莴苣类苦味素的方法。

背景技术

菊苣亦称为欧洲菊苣或法国苣荬菜，在日本称之为“苦白菜”，是药食同源的菊科菊苣属植物。研究表明，菊苣含有一般蔬菜没有的苦味物质，如马栗树皮素、马栗树皮苷、山莴苣素和山莴苣苦素等，这些苦味物质具有抗菌、改善消化、清肝利胆、解酒等功效。

目前，对菊苣属植物化学成分的研究主要集中在倍半萜类化合物，菊苣中的倍半萜类只要有山莴苣苦素、山莴苣素，山莴苣素分子式为C₁₅H₁₆O₅，山莴苣苦素分子式为C₂₃H₂₂O₇，山莴苣苦素在菊苣中含量高，专属性强，且具有抗疟疾作用。

授权公告号为CN102351824B的中国发明专利提供了一种山莴苣素和山莴苣苦素的制备方法，上述方法中采用高速逆流色谱法分离得到了山莴苣素和山莴苣苦素，但其涉及五种组分的混合溶剂的配置和分离操作，整体分离过程略显复杂。

发明内容

针对现有的菊苣分离存在的上述问题，现提供一种操作简单的分离方法，旨在有效从菊苣中提取山莴苣类苦味素。

具体技术方案如下：

一种从菊苣中提取山莴苣类苦味素的方法，具有这样的特征，包括如下步骤：

步骤一：将菊苣根粉碎后，用水进行超声波辅助浸提，提取物经过滤后减压浓缩获得总浸膏；

步骤二：将总浸膏分散于水中，利用石油醚和乙酸乙酯依次萃取水相，有机相经减压蒸馏后分别得到石油醚浸膏和乙酸乙酯浸膏；

步骤三：将步骤二中获得的乙酸乙酯浸膏用乙酸乙酯溶解后，100-150目硅胶柱层析梯度洗脱分离，梯度洗脱中流动相A为乙酸乙酯，流动相B为甲酸，流动相C为正丁醇，洗脱条件为：0-4min，45％A、50％B、5％C；4-10min，45-40％A、50-55％B、5％C；10-14min，40-30％A、55％B、5-15％C；14-20min，30％A、55％B、15％C，每份收集10-15ml，将流份用薄层色谱法进行跟踪，合并相同成分，减压浓缩，得到山窝苣素和山窝苣苦素；

步骤四：将步骤三中的山窝苣素粗品用乙酸乙酯溶解后，100-150目硅胶柱层析洗脱分离，洗脱相为石油醚50％、乙酸乙酯45％、甲醇5％，每份收集10-15ml，将流份用高效液相色谱法进行跟踪，合并相同成分，减压浓缩，得到山窝苣素；

步骤五：将步骤三中的山窝苣苦素粗品用乙酸乙酯溶解后，100-150目硅胶柱层析洗脱分离，洗脱相为石油醚50％、乙酸乙酯43％、氯仿7％，每份收集10-15ml，将流份用高效液相色谱法进行跟踪，合并相同成分，减压浓缩，得到山窝苣苦素。

上述的方法，还具有这样的特征，步骤一中水的pH值为6.5-7.2、温度为60-90℃，料水质量比为1:18-22。

上述的方法，还具有这样的特征，步骤一中浸提时间为30-50min。

本发明中浸提用超声波处理器的处理频率为50HZ。