[发明专利]一种家用纯净水机隐孢子虫滤除率检验方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种生物技术检测，特别是一种家用纯净水机隐孢子虫滤除率检验方法。

背景技术

隐孢子虫（Cryptosporidium Tyzzer,1907）为体积微小的球虫类寄生虫。广泛存在多种脊椎动物体内，寄生于人和大多数哺乳动物的主要为微小隐孢子虫（C.parvum），由微小隐孢子虫引起的疾病称隐孢子虫病（cryptosporidiosis），是一种以腹泻为主要临床表现的人畜共患性原虫病。本虫主要寄生于小肠上皮细胞的刷状缘纳虫空泡内。空肠近端是虫体寄生数量最多的部位，严重者可扩散到整个消化道。亦可寄生在呼吸道、肺脏、扁桃体、胰腺、胆囊和胆管等器官。

寄生于肠粘膜的虫体，使粘膜表面出现凹陷，或呈火山口状。寄生数量多时，可导致广泛的肠上皮细胞的绒毛萎缩、变短、变粗、或融合、移位和脱落，上皮细胞老化和脱落速度加快。固有层多形核白细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润。此外，艾滋病患者并发隐孢子虫性胆囊炎、胆管炎时，除呈急性炎症改变外，尚可引起坏疽样坏死。该病原体是目前威胁我国生活饮用水安全的重要因子，随着家庭用净水设备的普及和使用对于家用净水机组的对隐孢子虫滤除效果的检验和评价因为检验方法和技术限制很难普及和开展。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提出了一种具有成本较低，配制及使用方便且生物安全符合法规要求的家用纯净水机隐孢子虫滤除率检验方法。适于目前成品家用反渗透净水机组针对水体中所含隐孢子虫寄生虫滤除效果的检验和评价方法。

本发明要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的，一种家用纯净水机隐孢子虫滤除率检验方法，其特点是：使用微米胶体荧光微球为隐孢子虫模拟物，通过配置模拟浓度，经过微量定量计量泵注入到被检测纯净水机组中的供水管中，经过机组反渗透膜过滤后产生的纯水，进行流量实时计量后过0.22μm孔径的可拆卸不锈钢滤膜器，经过计量取样后将0.22μm滤膜取下，放在无荧光玻璃板中，于落射型荧光显微镜下观测和计数，并经过计算机图像识别和测量大小，计算得出隐孢子虫滤除率。

本发明要解决的技术问题还可以通过以下技术方案来进一步实现，所述的微米胶体荧光球，是指接枝了荧光染料异硫氰酸荧光素的硅胶微球，球体大小直径4－6μm之间。

本发明要解决的技术问题还可以通过以下技术方案来进一步实现，荧光微米胶球模拟浓度为每毫升900－1100个。

本发明要解决的技术问题还可以通过以下技术方案来进一步实现，微量定量计量泵为具有可调节范围的脉冲式计量泵，泵体进料口装有孔径为10μm的滤膜，以保证所进入检测供水管路的测试模拟物直径符合隐孢子虫直径大小。

本发明要解决的技术问题还可以通过以下技术方案来进一步实现，所述的流量实时计量采用非接触式超声波流量计，在流量计前段设有取样口，以检测测试水样的模拟物浓度，用于数据比对计算。

本发明要解决的技术问题还可以通过以下技术方案来进一步实现，所述的不锈钢滤膜器是以不锈钢筛板为承载体，后部设有负压真空装置的滤器，不锈钢滤膜器前端设有三通阀用于转换测试状态和非测试状态下的排空水的作用，负压工况值为-0.1Mpa，采用缓冲水汽分离器与正空泵链接。

本发明要解决的技术问题还可以通过以下技术方案来进一步实现，所述的落射型荧光显微镜为带有低温制冷模块的CCD电子图像采集的显微镜，以保护操作人员眼睛。

本发明要解决的技术问题还可以通过以下技术方案来进一步实现，所述的显微测量采用电子自动测量方式，由所配置与荧光显微镜的工作站直接在软件下实现检测，并计数。

本发明与现有技术相比，采用无生物危险的模拟隐孢子虫大小的水分散性好且可以实现光学条件下与背景明显分辨的荧光微硅胶颗粒，通过荧光落射型显微镜经过电子图像采集由计算机的图像软件实现观测判定和几何尺寸的测定，并且实验过程方便和重复，数据可靠。是一种实验生物安全符合法规要求且实验材料容易控制和获得的检验方法，以增强对目前市场上销售和生产的纯净水机组的隐孢子虫滤出效果的评价。

具体有益效果是：

(1)可以无限制使用该荧光微胶球用于模拟家用纯净水机组和净水机组的隐孢子虫滤除率测试，可以明显和背景干扰物区分和识别，具有典型性的几何尺寸和荧光特征；

(2)本方法的建立具有实验可重复性好，数据高可靠性；

(3)该方法具有符合生物安全规范要求，对环境无生物安全风险和污染；

(4)提高实验效率，实验中的消耗材料易获得和保存，配置方便且稳定性高，便于长周期实验需要；