[发明专利]一种大蒜气生鳞茎诱导方法有效
申请号: | 201710611010.2 | 申请日: | 2017-07-25 |
公开(公告)号: | CN107432245B | 公开(公告)日: | 2019-08-06 |
发明(设计)人: | 董玉惠;刘世琦;董飞;孙秀东;张现征 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 | 代理人: | 李茜 |
地址: | 271018 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蒜薹 花苞 培养基 无菌水冲洗 酒精消毒 气生鳞茎 消毒 制备 大蒜 备用 诱导 高温高压灭菌 液体MS培养基 次氯酸钠 光照条件 流水冲洗 工具剪 蔗糖 放入 剪取 无菌 下端 切除 采摘 并用 | ||
本发明涉及一种大蒜气生鳞茎诱导方法,该方法按照如下步骤进行:(1)蒜薹采摘及处理:使用无菌工具剪取蒜薹花苞段,并用酒精消毒后备用;(2)制备培养基:培养基为液体MS培养基,每升培养基中加入蔗糖30g,并将PH调为5.8,然后经高温高压灭菌20min,备用;(3)蒜薹花苞段的消毒处理:将剪取的蒜薹花苞段依次进行流水冲洗1~2h、酒精消毒30s、无菌水冲洗2~3次、次氯酸钠消毒35min,最后用无菌水冲洗3~5次;(4)培养:将消毒处理的蒜薹花苞段的最下端切除,并将剩余部分放入步骤(2)中制备的培养基中进行培养,培养时光照条件为2600 lx,16 h·d‑1,室温为(25±2)℃,培养时间为三周。
技术领域
本发明涉及大蒜组织培养与快繁的方法,属于农业生物工程技术领域,具体为一种大蒜气生鳞茎诱导方法。
背景技术
大蒜(Allium sativum L.)为无性繁殖作物,由于长期使用鳞茎繁殖,病毒逐代积累,再加上不良环境条件、不良栽培措施的影响,导致大蒜“退化”现象严重,给生产造成极大损失。为避免此种现象的持续,出现大蒜气生鳞茎(天蒜)繁殖,气生鳞茎(天蒜)繁殖时,天蒜采自蒜薹(花薹)顶端的花苞(生长点),而大蒜生长点部位一般不带病毒,因而可自然脱毒。大蒜气生鳞茎在生产实践上主要被用来提纯及复壮,但由于只有成熟的气生鳞茎才能做“种子”,而培养成熟的气生鳞茎会争夺地蒜的营养,影响地蒜的产量,降低种蒜的收益。
发明内容
本发明针对现有技术的不足,提供一种大蒜气生鳞茎诱导方法,利用新鲜的蒜薹作为外植体诱导气生鳞茎,不影响地蒜的正常生长,并实现了大蒜的脱毒和快繁。
本发明是通过如下技术方案实现的,提供一种大蒜气生鳞茎诱导方法,该诱导方法按照如下步骤进行:
(1)蒜薹采摘及处理:使用无菌工具剪取蒜薹花苞段,并用酒精消毒后备用;
(2)制备培养基:培养基为液体MS培养基,每升培养基中加入蔗糖30g,并将PH调为5.8,然后经高温高压灭菌20min,备用;
(3)蒜薹花苞段的消毒处理:将剪取的蒜薹花苞段依次进行流水冲洗1~2h、酒精消毒30s、无菌水冲洗2~3次、次氯酸钠消毒35min,最后用无菌水冲洗 3 ~ 5 次;
(4)培养:将消毒处理的蒜薹花苞段的最下端切除,并将剩余部分放入步骤(2)中制备的培养基中进行培养,培养时光照条件为 2 600 lx,16 h · d-1,室温为(25 ± 2)℃,培养时间为三周。
作为优选,步骤(2)中MS培养基配方为:每 1L基本培养基中仅含有
KNO3 1900mg, NH4NO3 1650mg,
MgSO4· 7H2O 370 mg, KH2PO4 170 mg,
CaCl2· 2H2O 440 mg, MnSO4· 4H2O 22.3 mg,
ZnSO4· 7H2O 8.6 mg, H3BO3 6.2mg,
KI 0.83 mg, Na2MoO4·2H2O 0.25 mg,
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