[发明专利]一种用于铁离子检测的香豆素荧光基团比率荧光分子探针及其合成和使用方法

权利要求书

1.一种用于铁离子检测的香豆素荧光基团比率荧光分子探针，其特征在于该荧光分子探针为4-甲基-7-羟基-8-[3-(1H-咪唑)丙酸基-2-氨亚甲基]-2H-苯并吡喃-2-酮，其结构式为：

2.制备权利要求1所述的一种用于铁离子检测的香豆素荧光基团比率荧光分子探针的方法，其特征在于该方法如下：

一、按4-甲基-7-羟基-8-醛基香豆素与L-组氨酸的摩尔比为1:(1～2)，将4-甲基-7-羟基-8-醛基香豆素与L-组氨酸加入到酸性溶剂中，回流反应4～6h，趁热抽滤，得到反应混合物；

二、将反应混合物加入到N,N-二甲基甲酰胺与乙醇的混合溶剂中，加热溶解，然后冷却，重结晶析出固体；将固体过滤出来，得到4-甲基-7-羟基-8-[3-(1H-咪唑)丙酸基-2-氨亚甲基]-2H-苯并吡喃-2-酮，即为用于铁离子检测的香豆素荧光基团比率荧光分子探针。

3.根据权利要求2所述的一种用于铁离子检测的香豆素荧光基团比率荧光分子探针的制备方法，其特征在于步骤一中的酸性溶剂为浓硫酸的乙醇溶液、浓盐酸的乙醇溶液或冰乙酸。

4.根据权利要求2或3所述的一种用于铁离子检测的香豆素荧光基团比率荧光分子探针的制备方法，其特征在于步骤二中N,N-二甲基甲酰胺和乙醇的体积比为1:(6～10)。

5.权利要求1所述的一种用于铁离子检测的香豆素荧光基团比率荧光分子探针的使用方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：

一、将用于铁离子检测的香豆素荧光基团比率荧光分子探针溶解于二甲基亚砜与HEPES缓冲溶液的混合液中，得到荧光分子探针溶液；其中HEPES缓冲溶液的pH＝7.2，混合液中二甲基亚砜与HEPES缓冲溶液的体积比为3：(6～7)，混合液中荧光分子探针的浓度为8～10μmol/L；

二、取荧光分子探针溶液，向其中加入待测样品，混合均匀，得到样品溶液；

三、用紫外分光光度计测试荧光分子探针溶液在波长为350nm处的吸光度值A₁，再测试样品溶液在波长为260nm处的吸光度值A₂，如果A₂≥2A₁，则可判定样品中含有Fe³⁺；或者用荧光光谱仪测试荧光分子探针溶液在发射波长为447nm时的荧光强度B₁，再测试样品溶液在发射波长为447nm时的荧光强度B₂，如果B₂≤10％B₁，则可判定样品中含有Fe³⁺。