[发明专利]一种检测免疫性血小板减少症血小板自身抗体的方法在审
| 申请号： | 201710608977.5 | 申请日： | 2017-07-25 |
| 公开（公告）号： | CN107389939A | 公开（公告）日： | 2017-11-24 |
| 发明（设计）人： | 冀学斌;张丽萍;李秋环 | 申请（专利权）人： | 冀学斌 |
| 主分类号： | G01N33/577 | 分类号： | G01N33/577 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 250012 山东省济南市历下区*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 免疫性 血小板 减少 自身抗体 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测免疫性血小板减少症血小板自身抗体的方法，其特征在于它采用如下步骤：
(1)制备备抗体包被多孔板，每孔内加入羊抗鼠单克隆抗体(一抗)，过夜孵育后，加入抗血小板单克隆抗体，室温孵育备用；
(2)离心机分离患者血清或血小板表面的血小板特异性抗体，加入正常人O型血小板，室温孵育，血小板溶解液(含蛋白酶抑制剂)溶解血小板，制成上清液；
(3)将上述上清液加入步骤1制备好的抗体包被多孔板，室温孵育，再加入碱性磷酸酶标记的羊抗人单克隆抗体(二抗)，室温孵育；
(4)加PNPP/底物缓冲剂溶液，室温孵育至显色，观察结果；
(5)所有试验数据用配对T检验进行统计学分析。
2.根据权利要求1所述的一种检测免疫性血小板减少症血小板自身抗体的方法，其特征在于：先将O型正常人血小板与患者待测血清或血小板洗脱液反应，洗涤后裂解血小板，离心取上清稀释后待用，在抗鼠抗体包被的多孔板中，先加入抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体(鼠抗人单克隆抗体)再加入稀释上清液，然后加入酶标二抗和底物，从而避免人抗鼠抗体与鼠单克隆抗体直接结合引起的干扰，避免假阳性的产生。
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